Иерсиниоз и псевдотуберкулез: Иерсиниоз и псевдотуберкулез — Кабинет инфекционных заболеваний — Отделения
Иерсиниоз и псевдотуберкулез — Кабинет инфекционных заболеваний — Отделения
Иерсиниоз и псевдотуберкулез – это кишечные сапрозоонозы, вызываемые иерсиниями, характеризующиеся поражением желудочно-кишечного тракта, выраженной токсико-вазарной симптоматикой и наклонностью (наиболее выраженной при псевдотуберкулезе) к генерализованному течению. Оба заболевания имеют отчетливо выраженную тенденцию индуцировать развитие иммунопатологии.
Этиология
Возбудители иерсиниоза (Y. enterocolitica) и псевдотуберкулеза (Y. pseudotuberculosis) относятся к семейству кишечных бактерий. Иерсинии представляют собой грамотрицательные палочки, которые растут как на обычных, так и на обедненных питательными веществами средах. Последние используются при бактериологическом исследовании по методу Петерсона и Кука (1963).
Иерсинии содержат О- и Н-антигены. Различия в строении 0-антигенов позволили выделить более 50 сероваров Y. enterocolitica. Наибольшее значение в патологии человека имеют серовары 03; 05,27; 07,8 и 09. У возбудителя псевдотуберкулеза — установлено наличие 8 сероваров. Наиболее часто заболевания у людей вызываются 1-м сероваром.
Многие штаммы иерсиний продуцируют экзотоксин (термостабильный энтеротоксин). При разрушении бактерий выделяется эндотоксин. Иерсинии обладают также способностью кадгезии, инвазии и внутриклеточному размножению. Инвазивные свойства у Y. pseudotuberculosis выражены в большей степени, чем у Y. entero-colitica.
Иерсинии относятся к психрофилам. При температуре холодильника (4-8 °С) они способны длительно сохраняться и размножаться на овощах, корнеплодах и других пищевых продуктах. В то же время, некоторые из штаммов бактерий обладают повышенной термоустойчивостью к высокой температуре и способны выдержать режим пастеризации. При кипячении (100°С) все штаммы иерсиний погибают через несколько секунд. Чувствительны к действию обычных дезинфектантов.
Эпидемиология
Иерсинии (Y.
Основным источником инфекции для человека при иерсиниозе являются сельскохозяйственные животные, реже – синантропные грызуны. Больной человек как источник инфекции имеет несравненно меньшее значение. При псевдотуберкулезе основными источниками инфекции являются синантропные и дикие грызуны. Человек, как правило, источником псевдотуберкулеза не является.
Основной путь распространения обеих инфекций – пищевой. Факторами передачи Y. enterocolitica чаще всего являются инфицированные мясные продукты, молоко, овощи, корнеплоды, вода. К факторам передачи Y. pseudotuberculosis относятся овощные блюда (салаты из капусты, моркови и др.) и молочные продукты, употребляемые в пищу без предварительной термической обработки. Водный путь передачи имеет при обеих инфекциях несравненно меньшее значение. Он обычно реализуется при употреблении воды из открытых водоемов. Другие пути передачи не имеют существенного значения в эпидемиологии иерсиниозов.
Заболевание встречается во всех возрастных группах, но чаще у детей первых лет жизни. Сезонный подъем заболеваемости иерсиниозом отмечается в холодное время года с пиком в ноябре. В некоторых регионах наблюдается два сезонных подъема — осенью и весной. Пик заболеваемости псевдотуберкулезом приходится на весенние месяцы (март-май). Иерсиниоз и псевдотуберкулез протекают в виде спорадических и групповых заболеваний.
Патогенез
Входными воротами для возбудителей иерсиниоза и псевдотуберкулеза служит желудочно-кишечный тракт. Максимально выраженная местная реакция в ответ на инвазию иерсиний регистрируется со стороны слизистой оболочки подвздошной кишки и ее лимфоидных образований. В подвздошной кишке развивается различной выраженности воспалительный процесс – терминальный илеит. По лимфатическим сосудам иерсиний проникают в мезентериальные лимфатические узлы и вызывают мезаденит. В патологический процесс могут быть вовлечены червеобразный отросток и слепая кишка.
На фоне инфекционно-воспалительных изменений развиваются токсический и токсико-вазарный (парез вазамоторов) процессы, связанные с токсинемией. На этом этапе инфекционный процесс, приобретая черты локализованной формы, может завершиться.

При длительном нахождении иерсиний и их токсинов в крови и органах больного происходит сенсибилизация организма. У части больных, как правило, с фенотипом HLA-B27, иерсиниоз и псевдотуберкулез могут явиться толчком к возникновению иммунопатологических реакций и состояний.
Заключительное звено патогенеза – освобождение организма от возбудителя, ведущее к выздоровлению.
Развитие специфического иммунитета при иерсиниозе и псевдотуберкулезе происходит медленно и он не является достаточно прочным, с чем связано нередкое развитие обострений и рецидивов болезни.
Клиника
Продолжительность инкубационного периода при иерсиниозе колеблется от 1 до 7 дней, а псевдотуберкулезе – от 3 до 21 дня.
На основе общих патогенетических закономерностей кишечных зоонозов и клинико-патогенетических особенностей иерсиниоза и псевдотуберкулеза могут быть выделены локализованная (гастро-интестиномезентериальная) и генерал и зеванная формы. Они могут иметьманифестноеили (реже) бессимптомное течение.
Локализованная (гастроинтестиномезентериальная) форма манифестного течения включает следующие варианты: гастроэнтеро-колит, гастроэнтерит, энтероколит, энтерит, острый терминальный илеит, мезаденит
Генерализованная форма манифестного течения может иметь две разновидности: токсикобактериемическая и септическая. В зависимости от преобладания той или иной симптоматики токсикобактериемическая разновидность генерализованной формы может протекать в следующих вариантах: экзантематозном, артритическом, желтушном (иерсиниозный гепатит), менингеальном, катаральном, смешанном и в виде иерсиниоза (псевдотуберкулеза) редких локализаций. В редких случаях (например, у иммунокомпрометированных лиц с хронической патологией печени и признаками тезауризмоза железа) развивается иерсиниозный сепсис. Бессимптомное течение при генерализованной форме может быть представлено реконвалесцентным вариантом. Последний обычно не характерен для псевдотуберкулеза.
По тяжести манифестного течения заболевания выделяют легкое, среднетяжелое и тяжелое течение. По характеру течения — гладкое и осложненное, в том числе с обострениями и рецидивами. По продолжительности заболевания и его исходам – острое (до 3 мес.), хроническое (более 3 мес.) и клиника последствий (резидуальная фаза).
Локализованная (застроинтестиномезентериальная) форма встречается в 70% случаев иерсиниоза и почти 30% псевдотуберкулеза. Наиболее частыми проявлениями данной формы являются гастроэнтероколитический, гастроэнтеритический, энтероколитический и энтеритический варианты течения болезни. Они регистрируются во всех возрастных группах, но в основном у детей в возрасте до 10 лет.
Клиническая картина указанных вариантов характеризуется наличием интоксикационного синдрома и симптомов поражения желудочно-кишечного тракта на том или ином его уровне.
Острый терминальный илеит сопровождается повышением температуры тела до 38-39°С, интенсивными болями в илеоцекальной области и диареей. Больные, как правило, описывают два вида болей: постоянного и на их фоне – схваткообразного типов.
Острый мезаденит характеризуется умеренно выраженной интоксикацией, субфебрильной температурой, меньшей, чем при терминальном илеите силой схваткообразных и постоянного типа болей. В дебюте заболевания может иметь место тошнота, рвота, жидкий стул до 3-5 раз за сутки. В дальнейшем у значительной части больных наблюдается развитие (за 4-6 дней) «инфильтрата» в илеоцекальной области, представляющего собой группу увеличенных мезентериальных узлов, и перитонеальной симптоматики.
Острый иерсиниозный (псевдотуберкулезный) аппендицит в отличие от вульгарного имеет более медленный темп развития от катаральной до деструктивной форм. Как следствие этого – большая частота обнаружения катарально измененного червеобразного отростка в ходе оперативного вмешательства, чем при вульгарном аппендиците. Однако и этот вариант не отличается гладким течением. Нередко после хирургического вмешательства развиваются признаки генерализации: высокая лихорадка, полилимфаденит, гепатоспленомегалия, экзантема.
Всем вариантам локализованной формы свойственна не только абдоминальная (желудочно-кишечная), но и внеабдоминальная симптоматика, обусловленная действием токсина и избыточной продукцией простагландинов на вазомоторы и эндотелий сосудов: инъекция сосудов склер и гиперемия конъюнктив, «малиновый» язык, гиперемия мягкого неба, артралгии, миалгии и др.
В периферической крови наблюдается лейкоцитоз, нейтрофилез, палочкоядерный сдвиг, увеличение СОЭ, иногда эозинофилия.
Генерализованная форма встречается примерно в 30% случаев манифестного течения иерсиниозаи 70% случаев псевдотуберкулеза. Она имеет две разновидности течения :токсикобактериемическая и септическая. Как при иерсиниозе, так и при псевдотуберкулезе обычно наблюдается токсикобактериемическое течение генерализованной формы. Септическое течение при обоих заболеваниях встречается крайне редко.
Токсикобактериемическое течение генерализованной формы наиболее хорошо изучено при экзантем атозном варианте псевдотуберкулеза, описанном ранее как дальневосточная скарлати неподобная лихорадка. Заболевание характеризуется острым началом. Больные жалуются на озноб, головную боль, миалгии и артралгии. Температура тела повышается до 38-40°С и держится на этом уровне в течение 5-7 сут, а при тяжелой форме и дольше. В первые дни болезни отмечаются тошнота, иногда рвота, жидкий стул, боли в животе. Нередко наблюдаются катаральные симптомы со стороны верхних дыхательных путей: першениеи умеренные боли при глотании, покашливание, насморк.
При объективном обследовании в 1-ю неделю заболевания кожа больных сухая, горячая, лицо одутловатое. Отмечается гиперемия конъюнктив, инъекция сосудов склер. Нередко, особенно у детей, определяется бледный носогубный треугольник. Слизистая оболочка ротоглотки диффузно гиперемирована. У части больных на мягком небе обнаруживается точечная энантема. К числу кардинальных признаков этого заболевания относятся точечная скарлатиноподобная экзантема в сочетании с симптомами «капюшона» (гиперемия лица и шеи), «перчаток» и «носков» (ограниченная гиперемия кистей и стоп). Эти кардинальные симптомы появляются чаще всего на 2-4-й день болезни. Продолжительность существования сыпи – 1-7 дней. После ее исчезновения, со 2-й недели болезни, у большинства больных появляется отрубевидное шелушение кожи туловища, лица и шеи и пластинчатое (листовидное) – кожи ладоней и стоп.
Следует заметить, что подобный тип экзантемы практически не встречается при иерсиниозе. Для него более характерна мелкопятнистая сыпь на симметричных участках кожи туловища и/или конечностей, которая исчезает в срок от нескольких часов до 3-4 сут.
При пальпации находят умеренно увеличенные и болезненные периферические лимфоузлы. Определяются лабильность и учащение пульса, соответствующее температуре тела. Артериальное давление несколько снижено.
Органы пищеварительной системы закономерно вовлекаются в патологический процесс. Язык, обложенный в первые дни болезни белым налетом, часто к 5-7-му дню очищается и становится «малиновым». При пальпации живота отмечают болезненность и урчание в илеоцекальной области, с меньшим постоянством в эпи- и мезогастрии. Выявляются положительные симптомы Падалки, «перекрестный» Штернберга. У больных с пониженным питанием можно прощупать увеличенные и болезненные мезентериальные лимфатические узлы. Обычно в патологический процесс вовлекается печень. л, палочкоядерный сдвиг, иногда эозинофилия, увеличение СОЭ до 25-50 мм/ч.
Заболевание нередко сопровождается развитием признаков инфекционно-токсического интерстициального нефрита. В некоторых случаях тяжелого течения болезни наблюдаются признаки серозного менингита.
У части больных 2-я и 3-я недели болезни характеризуются появлением симптомов, свидетельствующих об иммунопатологической перестройке. В это тпериод нередко появляются уртикарные, макулезные и макулопапулезные высыпания с локализацией на туловище и конечностях, чаще в области крупных суставов. Возникает узловатая эритема. У некоторых больных развивается реактивный полиартрит, болезнь Рейтера.
Иногда в этот период заболевания выявляют миокардит, нефрит, уретрит, цистит, конъюнктивит, иридоциклит и другие поражения внутренних органов.
По преобладанию той или иной симптоматики в пределахтокси-кобактериемического течения генерализованной формы заболевания выделяют следующие варианты: экзантематозный, артритический, желтушный (иерсиниозный/псевдотуберкулезный гепатит), менингеальный, катаральный и иерсиниоз (псевдотуберкулез) редких локализаций.
Обострения и рецидивы часто осложняют течение иерсиниоза и псевдотуберкулеза. Они встречаются у 1/ больных и характеризуются повторной волной лихорадки и симптомами локальных поражений.
В период реконвалесценции температура тела снижается до нормальной, симптомы интоксикации исчезают, нормализуются функции внутренних органов.
Тяжесть течения иерсиниоза и псевдотуберкулеза определяется выраженностью интоксикационного синдрома и степенью вовлечения в патологический процесс внутренних органов. Чаще заболевание протекает в легкой и среднетяжелой формах.
Септическое течение генерализованной формы иерсиниоза и псевдотуберкулеза встречается очень редко. Оно, как правило, развивается при выраженном иммунодефиците, у лиц с хронической патологией печени и признаками тезауризмоза железа. Течение заболевания характеризуется тяжелой интоксикацией, микроабсцедированием внутренних органов, гепатоспленомегалией, нередко диареей, длительным рецидивирующим течением и, несмотря на лечение, высокой летальностью.
При всех формах манифестного течения иерсиниозной инфекции продолжительность заболевания обычно не превышает 1,5 мес. Однако иногда встречается затяжное течение болезни (от 1,5 до 3 мес) и в редких случаях хроническое (более 3 мес). Наличие заболевания, этиологически связанного с перенесенным иерсиниозом, но при доказанном бактериологически и серологически отсутствии возбудителя в организме больного должно расцениваться как клиника последствий иерсиниоза (резидуальная фаза).
Бессимптомное течение может быть острым (до 3 мес) и хроническим (более 3 мес). Последнее не характерно для псевдотуберкулеза. Кроме того, при иерсиниозев отличие от псевдотуберкулеза наблюдается не только субклиническое, но и реконвалесцентное бактериовыделение возбудителей болезни. Лица, имеющие бессимптомное течение заболевания, выявляются активно при обследовании работников пищевых предприятий и контактных – в очагах.
Прогноз в большинстве случаев, за исключением септического течения болезни, благоприятный.
Диагностика
Из клинических признаков наибольшее диагностическое значение имеет сочетание синдрома поражения желудочно-кишечного тракта и «внекишечной» токсико-вазарной симптоматики. Данные эпидемиологического анамнеза, особенно при групповом характере заболеваемости, также имеют большое значение в распознавании иерсиниоза и псевдотуберкулеза. Однако решающим в установлении окончательного диагноза являются специфические методы диагностики – бактериологический и серологический.
Основными материалам и для бактериологического исследования служат испражнения, кровь, цереброспинальная жидкость, резецированные лимфатические узлы и червеобразный отросток. Для определения присутствия псевдотуберкулезных антигенов в фекалиях и другом материале используют иммуноферментный анализ (ИФА).
Серологическая диагностика имеет большое значение для подтверждения не только клинического диагноза, но и этиологической роли выделенных иерсиний. Она осуществляется с помощью РА и РНГА методом парных сывороток. Исследуют сыворотки крови, взятые в начале и на 3-й неделе болезни. Диагностическим для РА считается титр антител 1:80 и выше, а для РНГА-1:160 и выше.
В экспресс-диагностике иерсиниоза используют РНГА с иммуноглобулиновыми диагностикумами и МФА.
Определенное значение в диагностике имеет также гистологическое исследование биоптатов лимфатических узлов и других органов.
Дифференциальная диагностика иерсиниоза и псевдотуберкулеза зависит от клинического варианта болезни. Наиболее часто возникает необходимость дифференцировать эти заболевания с острыми кишечными инфекциями, аппендицитом, различными заболеваниями суставов, вирусным гепатитом, сепсисом иной этиологии и др.
Лечение
В качестве этиотропных средств применяют антибиотики, сульфаниламиды и химиопрепараты. К препаратам выбора при генерализованной форме заболеваний относятся фторхинолоны. К препаратам резерва — цефалоспорины 3-го поколения, тетрациклины и левомицетин. Аминогликозиды обычно используют при лечении больных с иерсиниозным (псевдотуберкулезным) гепатитом. Для лечения больных с гастроинтестиномезентериальной формой (варианты: гастроэнтероколит, гастроэнтерит, энтероколит, энтерит) могут быть использованы препараты из группы котримоксазола и нитрофурана. Продолжительность этиотропной терапии зависит от формы заболевания. При локализованной форме она составляет 7-10 дней, при генерализованной – не менее 12-14 дней.
Патогенетическая терапия предусматривает назначение дезинтоксикационных, общеукрепляющих и стимулирующих, а также десенсибилизирующих средств. В некоторых случаях используют глюкозоэлектролитныеи полиионные растворы для регидратации.
Больных с септическим течением заболевания лечат в соответствие с принципами лечения сепсиса, используя 2-3 антибиотика (фторхинолоны, аминогликозиды, цефалоспорины) внутривенно в сочетании с интенсивной патогенетической терапией.
Больные с бессимптомным течением получают терапию в зависимости от варианта (субклинический или реконвалесцентный) и продолжительности бактериовыделения. Лечение острого субклинического варианта соответствует терапии легкого течения локализованной формы. В терапии хронического субклинического и реконвалесцентного вариантов используют фторхинолоны, аминогликозиды, рифампицин в комплексе с иммуноориентированными средствами.
По показаниям проводится оперативное лечение.
Профилактика
Контроль за состоянием овощехранилищ, борьба с грызунами.
особенности течения, диагностика, принципы лечения
Авторы: Т.Д. Звягинцева, д.м.н., профессор, заведующая кафедрой гастроэнтерологии, Л.А. Мирзоева, к.м.н., доцент, Харьковская медицинская академия последипломного образования
Выявление, диагностика и лечение иерсиниозов, безусловно, является серьезной проблемой прежде всего
для врачей-инфекционистов, эпидемиологов, микробиологов. Однако полиморфизм клинической симптоматики, неспецифичность, нередко стертая картина начальных проявлений, сходство клиники с другими заболеваниями кишечника (воспалительной, инфекционной, опухолевой природы), вовлечение в патологический процесс многих органов и систем, преимущественная спорадичность возникновения болезни, возможность хронизации приводят к тому, что, будучи изначально инфекционными, иерсиниоз и псевдотуберкулез остаются нераспознанными, скрываясь под маской различных заболеваний органов пищеварения, опорно-двигательного аппарата, соединительной ткани, нервной системы, кожи и др.
Это должно быть хорошо известно интернистам, гастроэнтерологам, терапевтам еще и потому, что из-за наличия амбулаторных форм кишечного иерсиниоза (КИ) врачи именно этих профессий осуществляют не только первичный, но и последующие медицинские осмотры. С предполагаемым соматическим диагнозом больных госпитализируют в терапевтические отделения для обследования, что может привести к возникновению внутрибольничного инфицирования.
В гастроэнтерологические отделения попадают главным образом больные с желудочно-кишечной формой иерсиниоза, преимущественно с иерсиниозными илеитами. По свидетельству А.И. Парфенова (2006 г.), хронический иерсиниозный илеит среди госпитализированных больных встречается в 4 раза чаще, чем гранулематозный (болезнь Крона).
Эпидемиология
Иерсиниоз широко распространен во многих странах, в различных климатических зонах. Причиной заболевания являются полиморфные грамотрицательные палочки семейства Enterobacteriaceae – Yersinia enterocolitica и Yersinia pseudotuberculosis. Основной резервуар возбудителя – мелкие грызуны, свиньи и другие домашние и дикие животные. Они обсеменяют почву, воду, продукты.
В организм человека иерсинии попадают алиментарным, фекально-оральным путем, при внедрении бактерий непосредственно в кожу, иногда при переливании инфицированной крови.
Обладая наибольшей тропностью к органам, богатым лимфоидными элементами и фиксированными макрофагами (лимфатические узлы, печень, селезенка), иерсинии могут там длительно персистировать, вызывая повторные волны заболевания или обусловливая переход процесса в хронический.
Факторами передачи Y. еnterocolitica чаще всего бывают зараженные мясные продукты, молоко, овощи, вода; Y. pseudotuberculosis – овощные и молочные продукты, не прошедшие термическую обработку. Употребление воды из инфицированных открытых водоемов может явиться причиной заражения обеими инфекциями.
Иерсинии способны длительно существовать при температуре +4-8
оС и размножаться в пищевых продуктах. Некоторые штаммы бактерий способны выдерживать температурные режимы пастеризации, но при кипячении все штаммы иерсиний погибают через несколько секунд. Они также чувствительны к действию обычных дезинфицирующих средств.
Для иерсиниозов характерен сезонный подъем заболеваемости: в ноябре отмечается пик заражения Y. enterocolitica, в марте-мае – инфицирования Y. pseudotuberculosis. В некоторых регионах наблюдается два сезонных подъема заболеваемости – осенью и весной.
Иерсиниозы встречаются преимущественно в виде спорадических случаев, но могут отмечаться и эпидемические вспышки.
Заболеванию подвержены люди всех возрастов; мужчины предрасположены к нему несколько больше, чем женщины. Иерсиниоз характеризуется первичным поражением кишечника, склонностью к генерализованному течению и системным проявлением.
Патогенез и клиника
При попадании в кишечник иерсинии внедряются в лимфоидные образования кишки, регионарные лимфатические узлы брыжейки и вызывают воспалительный процесс – терминальный илеит, мезаденит. В процесс могут вовлекаться слепая кишка и аппендикс.
Бактериально-токсическое поражение многих органов и систем наблюдается при прохождении иерсиниями лимфатического барьера кишечника: возникает бактериемия, развиваются генерализованные формы заболевания, возможно развитие полилимфаденита, полиартрита, миозита, нефрита, уретрита, менингита и др.
Инкубационный период при заражении Y. enterocolitica длится 1-7 дней, а Y. pseudotuberculosis – 3-21 день.
У большинства пациентов (60%) заболевание начинается остро с повышения температуры, появления болей в животе, диареи, нередко с примесью крови и слизи.
Частота стула, как правило, 3-5 раз в сутки, но у некоторых пациентов может достигать 15 и более. Боли в животе бывают довольно выраженными, у части больных сопровождаются высокой температурой. Со временем частота стула уменьшается, снижается температура тела, уменьшаются или исчезают боли. В среднем диарея длится 2 нед, но продолжительность ее весьма вариабельна – от одних суток до нескольких месяцев.
Гастроинтестинальная форма иерсиниоза с поражением подвздошной и слепой кишки – наиболее частый и типичный вариант заболевания (встречается в 55-75% случаев). Могут развиваться осложнения: кишечные кровотечения, изъязвления слизистой оболочки, некроз и перфорация тонкой или толстой кишки, перитонит (чаще ограниченный, реже разлитой), восходящий холангит, тромбоз брыжеечных вен, дивертикулит, токсический мегаколон, илеоцекальная инвагинация, спаечный процесс, явления кишечной непроходимости, которые впоследствии могут стать причиной смерти больного.
Возможно бессимптомное течение желудочно-кишечной формы иерсиниоза; иногда единственным клиническим проявлением гастроинтестинального иерсиниоза является диарея. В 30-40% случаев субклинические формы КИ протекают без диареи.
Манифестные формы могут иметь легкое, среднетяжелое и тяжелое течение, протекать с осложнениями и рецидивами.
Продолжительность манифестных форм иерсиниоза составляет 1,5 мес. Однако может встречаться затяжное течение болезни (1,5-3 мес) и в редких случаях – хроническое (более 3-6 мес). Развитие хронических заболеваний желудочно-кишечного тракта, соединительной ткани, обусловленных перенесенным кишечным иерсиниозом, расценивается как клиника последствий иерсиниоза (резидуальная фаза).
Затяжной иерсиниоз (ЗИ) протекает с чередованием периодов обострений (1-3 раза в год) и ремиссий. По данным литературы, ЗИ формируется после острого у 5-18% больных иерсиниозом, чаще всего он проявляется гастроинтестинальной и абдоминальной (мезаденит, аппендицит) формами, а также реактивным полиартритом, длительной лихорадкой, узловатой эритемой, синдромом Рейтера и др.
Воспаление лимфатических узлов брюшной полости – мезаденит – наблюдается преимущественно у молодых людей. Клинически проявляется схваткообразными или постоянными болями в животе; сопровождается субфебрильной температурой, умеренно выраженной интоксикацией. Иногда в дебюте заболевания могут быть тошнота, рвота, жидкий стул до 3-5 раз в сутки. У значительной части больных в течение 4-6 дней развивается инфильтрат в правой подвздошной области, представляющий собой группу увеличенных мезентериальных лимфоузлов; может наблюдаться симптоматика перитонита. В тяжелых случаях поражение лимфатических узлов осложняется некрозом кишки, кишечным кровотечением, тромбозом брыжеечных сосудов. У части больных приходится прибегать к оперативному вмешательству.
При отсутствии диареи мезаденит и болезнь Крона трудно отличить от аппендицита. Обычно наблюдаются субфебрильная температура, боль и болезненность при пальпации в правой подвздошной области, повышенный тонус мышц передней брюшной стенки, симптом Щеткина-Блюмберга.
Даже при локализированной форме иерсиниоза, кроме желудочно-кишечных проявлений, у больных возникает и внекишечная симптоматика. Это обусловлено как действием токсинов, так и влиянием избыточно выделяемых простагландинов на эндотелий сосудов. При осмотре пациентов наблюдается инъекция сосудов склер, гиперемия конъюнктив, слизистой оболочки полости рта и др. Больные жалуются на боли в суставах, мышцах. Длительная персистенция иерсиний и их токсинов в крови и органах инфицированных людей вызывает сенсибилизацию организма, вследствие чего возникают иммунологические реакции и различные аллергические состояния, макулезные, макуло-папулезные высыпания на туловище и конечностях, чаще в области крупных суставов, реактивный артрит, узловатая эритема.
В патогенезе реактивного артрита имеют значение генетические факторы: большинство больных являются носителями HLA-B27. При реактивном артрите, осложняющем иерсиниоз, в синовиальной жидкости возбудителей не обнаруживают, но выявляют антигены иерсиний. Возникновение реактивного артрита объясняют одним из возможных механизмов:
– в организме человека возбудитель длительно сохраняется, поскольку отсутствует иммунный ответ на антигены иерсиний из-за их схожести с HLA-B27;
– реактивный артрит – это иммунный ответ на антигенные детерминанты, общие для возбудителя и HLA-B27.
Следовательно, наличие HLA-B27 служит важнейшим фактором риска не только иерсиниоза и реактивного артрита, но и анкилозирующего спондилита.
В возникновении реактивного артрита особенно важен местный клеточный иммунитет, опосредованный Т-лимфоцитами.
В сроки от нескольких суток до 3 нед после появления диареи иерсиниоз может осложниться узловатой эритемой, обычно у женщин старше 20 лет. Патогенез этого заболевания не изучен. Узловатая эритема чаще локализуется на нижних конечностях и исчезает в течение месяца.
Менее распространенные осложнения иерсиниоза – увеит, ирит, конъюнктивит, уретрит, гломерулонефрит, синдром Рейтера (артрит + конъюнктивит + уретрит).
Внекишечные проявления иерсиниоза клинически сближают его с болезнью Крона.
Септическая форма иерсиниоза представляет собой тяжелое заболевание, сопровождающееся лихорадкой, лейкоцитозом, часто болью в животе и желтухой, но без явных очагов инфекции. Встречается редко (2-6% случаев), в основном у ослабленных больных с нарушениями иммунитета.
Факторами риска вызванного Y. enterocolitica сепсиса и вторичных очагов инфекции являются хронические заболевания печени, злокачественные новообразования, сахарный диабет, иммуносупрессивная терапия, алкоголизм, истощение, пожилой возраст, гемолитические анемии.
Вторичные очаги инфекции могут возникать в любом органе: абсцесс печени, селезенки, почки, легкого, скелетных мышц, кожи. Встречаются гнойный лимфаденит, остеомиелит, менингит, перитонит, инфекция мочевыводящих путей, пневмония, эмпиема плевры, эндокардит, перикардит, септическая аневризма, гнойный артрит, гнойный конъюнктивит, панофтальмит, пустулы или пузыри на коже. Все эти проявления возможны как при септической форме иерсиниоза, так и в отсутствие сепсиса.
Диагностика
Диагностика иерсиниоза и псевдотуберкулеза основывается на бактериологическом и серологическом методах исследования.
Лабораторные данные при указанных неосложненных заболеваниях неспецифичны. Количество лейкоцитов в норме или слегка увеличено, часто отмечается умеренный сдвиг лейкоцитарной формулы влево. Однако при реактивном артрите СОЭ может достигать 100 мм/ч, при этом ревматоидный фактор и антинуклеарные антитела обычно отсутствуют.
Стандартным методам клинической микробиологии подвергаются кровь, спинномозговая жидкость, ткань лимфоузлов, перитонеальная жидкость (в норме они стерильны) или содержимое абсцесса.
Наибольшей специфичностью обладает выделение иерсиний из кала, однако вероятность их обнаружения невелика: этому препятствует их медленный рост и колонизация селективных сред нормальной микрофлорой толстой кишки.
Для подтверждения диагноза иерсиниоза или псевдотуберкулеза пользуются серологическими методами, чаще всего реакцией агглютинации или иммуноферментным анализом (РА).
В типичных неосложненных случаях иерсиниоза и псевдотуберкулеза титр агглютинирующих антител начинает повышаться на первой неделе заболевания, достигает максимума на второй, после чего постепенно снижается, возвращаясь к норме через 3-6 мес. У некоторых больных антитела определяются в течение нескольких лет.
Для РА диагностическим считается титр 1:80 и выше, для реакции непрямой гемагглютинации – 1:160 и выше.
Дифференциальную диагностику проводят с учетом клинической формы заболевания. Прежде всего, следует исключить острые кишечные инфекции, острый аппендицит, вирусные гепатиты, различные заболевания суставов, сепсис иной этиологии.
При рентгенологическом исследовании кишечника пораженная часть подвздошной кишки резко сужена, рельеф слизистой оболочки сглажен (симптом «шнура»). В последующем возможно развитие хронического гранулематозно-язвенного поражения подвздошной кишки, которое морфологически неотличимо от болезни Крона. В пользу иерсиниоза свидетельствует быстрая положительная динамика клинических симптомов и морфологических изменений в терминальном отделе подвздошной кишки в процессе лечения антибактериальными препаратами, тогда как в лечении болезни Крона эффективны глюкокортикоиды, месалазин.
Возникают сложности при дифференциальной диагностике иерсиниозного гепатита и гепатитов вирусной этиологии. Иерсиниозный гепатит может быть как проявлением генерализованной формы иерсиниоза, так и его самостоятельным вариантом. При этом с самого начала заболевания повышается содержание билирубина крови, незначительно повышается активность трансаминаз, выражены признаки интоксикации.
Лечение
Лечение больных иерсиниозом зависит от клинического варианта заболевания. Неосложненные формы кишечного иерсиниоза требуют лечения этиотропными средствами, проведения детоксикационной терапии (внутрь или парентерально – зависит от тяжести состояния больного) 7-10-дневным курсом.
При септической форме иерсиниоза, вторичных очагах инфекции, а также кишечной форме иерсиниоза, протекающего на фоне ослабленного иммунитета, назначают 2-3 вида антибактериальных препаратов на протяжении 12-14 дней, проводят дезинтоксикационную терапию, назначают средства, способствующие регидратации, при необходимости используют пробиотики, полиферментные препараты.
Y. enterocolitica и Y. pseudotuberculosis (выделяемые их штаммы) чувствительны к аминогликозидам, цефалоспоринам третьего поколения, фторхинолонам, левомицетину, тетрациклинам и триметоприму/сульфаметоксазолу. Наибольшим бактерицидным действием, что подтверждено экспериментально, обладают фторхинолоны. Они являются препаратами выбора при генерализованных формах иерсиниоза. Оптимальные дозы препаратов и продолжительность лечения устанавливаются эмпирически.
Y. enterocolitica и Y. pseudotuberculosis устойчивы к β-лактамным антибиотикам: бензилпенициллину, ампициллину, карбенициллину, ко всем цефалоспоринам первого и большинству цефалоспоринов второго поколения.
Задачи лечения иерсиниоза, симптоматика которого сходна с проявлениями аппендицита, решаются совместно с хирургом, поскольку вопросы дифференциальной диагностики представляют очень большие трудности.
Для профилактики иерсиниоза и псевдотуберкулеза следует соблюдать санитарно-гигиенические правила, правила приготовления и хранения пищи, особенно на предприятиях общественного питания. Не следует употреблять в пищу недостаточно проваренное или прожаренное мясо, особенно свинину.
Больных с диареей, находящихся на стационарном лечении, целесообразно изолировать до установления этиологии заболевания.
Проблема диагностики и лечения затяжных и особенно хронических форм иерсиниозов не может быть решена силами одних инфекционистов; активное участие в ее преодолении должны принимать гастроэнтерологи, терапевты, ревматологи, хирурги.
Список литературы находится в редакции.
СТАТТІ ЗА ТЕМОЮ
29.04.2021 Ендокринологія Стеатоз печінки і підшлункової залози: зв’язок і практичні аспекти замісної терапії18-19 лютого 2021 року, у рамках післядипломної тренінг-програми для професійного вдосконалення лікарів «Мистецтво лікування», спеціалісти зі сфери охорони здоров’я мали можливість поліпшити свої знання стосовно практичних моментів контролю симптомів захворювань внутрішніх органів. На цьому заході було заслухано багато цікавих доповідей, одну з них – про взаємозв’язок між стеатозом печінки та підшлункової залози (ПЗ) – представила професор кафедри внутрішньої медицини № 2 та фтизіатрії Дніпровського державного медичного університету, доктор медичних наук, професор Олександра Юріївна Філіппова. …
29.04.2021 Ендокринологія Стратегії запобігання кардіометаболічним ускладненням при предіабеті і цукровому діабеті 2 типу19-20 лютого 2021 року у Львові, за участю кафедри променевої діагностики Львівського національного медичного університету (ЛНМУ) ім. Данила Галицького та ГО «Асоціація фахівців серцево-судинної патології України», відбулася міжнародна медична конференція «Від діагностики до клінічних стратегій». Ключовою темою заходу було значення інструментальних методів обстеження для діагностики та формування стратегії ведення пацієнтів. У робочу програму увійшли, крім виступів, інтерактивний розгляд клінічних випадків, вебінари з іноземними спікерами, секція «Питання-Відповіді». …
29.04.2021 Ендокринологія Хвороба Грейвса та її наслідки: сучасний стан проблемиНапередодні весни відбулась онлайн-конференція в рамках науково-освітнього проєкту «Школа ендокринолога». У заході взяли участь провідні вітчизняні фахівці, які у своїх доповідях розповіли про актуальні проблеми й основні сучасні тенденції лікування і діагностики в клінічній ендокринології. За традицією зі вступною промовою звернувся до учасників конференції науковий керівник науково-освітнього проєкту «Школа ендокринолога» – президент Української асоціації клінічних ендокринологів, директор ДУ «Інститут ендокринології та обміну речовин ім. В.П. Комісаренка НАМН України» (м. Київ), академік НАМН України, член-кореспондент НАН України, завідувач кафедри ендокринології Національного університету охорони здоров’я (НУОЗ) України ім. П.Л. Шупика МОЗ України (м. Київ), доктор медичних наук, професор Микола Дмитрович Тронько. Незмінним модератором заходу була керівник відділу клінічної діабетології ДУ «Інститут ендокринології та обміну речовин ім. В.П. Комісаренка НАМН України», доктор медичних наук Любов Костянтинівна Соколова. …
29.04.2021 Ендокринологія Місце пегвісоманту в лікуванні пацієнтів з акромегалією згідно з оновленими міжнародними рекомендаціями 2020 і 2021 рр.Акромегалія – хронічне агресивне прогресуюче потенційно летальне захворювання, спричинене аденомою гіпофіза, що секретує гормон росту (ГР), і характеризується підвищенням рівнів циркулюючого ГР і інсуліноподібного фактора росту (ІФР)-1 [1]. Деформації обличчя й кінцівок унаслідок надмірного росту м’яких тканин, а також системні ускладнення, що уражають кістки, суглоби [2], серцево-судинну і дихальну системи [3], у поєднанні з метаболічними й онкологічними ускладненнями, зумовлюють особливу тяжкість клінічного перебігу хвороби, зниження якості життя і показників виживання [4, 5]. …
Yersinia pseudotuberculosis, Yersinia enterocolitica, IgМ, полуколичественно: исследования в лаборатории KDLmed
Специфические иммуноглобулины класса IgМ к бактериям Y. pseudotuberculosis и Y. enterocolitica, которые вырабатываются иммунной системой в ответ на инфицирование данными микроорганизмами. Наличие таких антител в крови чаще всего указывает на острую фазу заболевания – псевдотуберкулёза или кишечного иерсиниоза.
Синонимы русские
Возбудители псевдотуберкулёза и кишечного иерсиниоза.
Синонимы английские
Yersinia Species Antibodies, IgМ.
Метод исследования
Иммуноферментный анализ (ИФА).
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Венозную кровь.
Как правильно подготовиться к исследованию?
Не курить в течение 30 минут до сдачи крови.
Общая информация об исследовании
Иерсинии – грамотрицательные палочки из семейства энтеробактерий. Y. pseudotuberculosis является причиной псевдотуберкулёза, Y. enterocolitica – кишечного иерсиниоза. Эти микроорганизмы опасны не только для человека, но и для многих животных. В распространении инфекции большое значение имеют грызуны. Бактерии устойчивы к окружающей среде, способны размножаться и накапливаться в почве, водопроводной воде, но быстро гибнут под действием солнечных лучей и при кипячении.
Источником инфекции может быть больной человек, животное или почва. Человек заражается в основном через мясо, рыбу, молоко, овощи, фрукты и сырую воду, а также при уходе за больными животными.
Отмечается сезонность инфекции – большинство случаев регистрируется в холодное время года, что связано с массовой миграцией грызунов в продуктовые хранилища. Возможны как единичные случаи заражения, так и эпидемические вспышки в коллективах.
Симптомыпсевдотуберкулёза и кишечного иерсиниоза очень схожи, и отличить возбудителей иногда возможно только с помощью лабораторных методов.
Тяжесть заболевания зависит от свойств (вирулентности) возбудителя, количества бактерий, попавших в организм, возраста инфицированного, состояния его иммунной системы и сопутствующих заболеваний, генетических особенностей. Чаще им страдают дети.
Инкубационный период псевдотуберкулёза составляет от 24 часов до 4 недель (в среднем 7-10 дней), при кишечном иерсиниозе он короче – от нескольких часов до 4-5 дней. Обычно всё начинается с диареи, боли в животе и лихорадки, интоксикационного синдрома, причем диарея при кишечном иерсиниозе сильнее, а при псевдотуберкулезе слабее или вовсе может отсутствовать. На 1-4-й день болезни у 90 % инфицированных Y. pseudotuberculosis появляется скарлатиноподобная сыпь, отекают кисти и стопы. Заболевания могут как ограничиваться проявлениями острой кишечной инфекции с рвотой, диарей, так и иметь более распространённые формы с поражением мезентериальных лимфатических узлов, терминальным илеитом, мезаденитом или даже сепсисом. В некоторых случаях течение инфекции напоминает острый аппендицит. В патологический процесс нередко вовлекаются почки, печень, поджелудочная железа, сердечно-сосудистая и нервная система. Иногда развивается респираторный синдром с болями в горле, покраснением задней стенки глотки, отёчностью нёба, кашлем и заложенностью носа. При кишечном иерсиниозе возможен переход инфекции в хроническую форму.
После инфицирования Y. enterocolitica в редких случаях бывают такие осложнения, как реактивный увеит, ирит, конъюнктивит, гломерулонефрит, гемолитико-уремический синдром, узловатая эритема. У HLA-B27-положительных лиц более высокий риск развития реактивного артрита и аутоиммунных заболеваний при иерсиниозной инфекции.
Антитела класса IgМ вырабатываются в первые дни заболевания и после выздоровления пациента циркулируют в его крови 4-6 месяцев.
Рекомендовано определять уровень антител в парных сыворотках, взятых в начале заболевания и через 7-10 дней. Повышение уровня IgM однозначно указывает на острую инфекцию – кишечный иерсиниоз или псевдотуберкулёз (в зависимости от вида возбудителя).
Для чего используется исследование?
-
Для диагностики псевдотуберкулёза и/или кишечного иерсиниоза.
-
Для дифференциальной диагностики острых кишечных инфекций.
-
Для дифференциальной диагностики острых инфекционных заболеваний с полиорганным поражением и скарлатиноподобной сыпью.
-
Для выявления ранее перенесённой (за последние 4-6 месяцев) иерсиниозной инфекции.
-
Для выяснения причин реактивного артрита.
Когда назначается исследование?
-
При симптомах острой кишечной инфекции (рвоте, диарее, лихорадке), сопровождающихся поражением печени, лимфатических узлов, скарлатиноподобной сыпью, отёчностью кистей и стоп, артритами.
-
При наличии иерсиниозной инфекции в очаге заражения.
-
При обследовании пациента с реактивным артритом, болезнью Бехчета, синдромом Рейтера, инфекционными артропатиями.
Что означают результаты?
Референсные значения
Результат: отрицательно.
КП (коэффициент позитивности): 0 — 0,89.
Положительный результат:
-
текущая иерсиниозная инфекция (псевдотуберкулёз / кишечный иерсиниоз),
-
ранее перенесённая иерсиниозная инфекция (псевдотуберкулёз / кишечный иерсиниоз).
Сомнительный результат:
-
ранний период болезни (начало образования антител),
-
недавно перенесённая инфекция и снижение специфических антител.
При сомнительном результате анализ необходимо повторить через 7-14 дней.
Отрицательный результат:
-
отсутствие инфицирования иерсиниями,
-
ранний период инфицирования (до образования антител) или длительный период после выздоровления.
Что может влиять на результат?
Гемолиз пробы, её перегрев и неправильное хранение.
Важные замечания
Возможна перекрёстная реакция с антителами к возбудителям чумы (Yersinia pestis), болезни Лайма (Borrelia Burgdorferi), бруцеллёза и риккетсиоза, а также с тиреоидстимулирующим иммуноглобулином (при базедовой болезни). В связи с этим при оценке результатов исследования важно учитывать клиническую картину заболевания.
Также рекомендуется
- Yersinia pseudotuberculosis, ДНК [ПЦР]
- Yersinia pseudotuberculosis, Yersinia enterocolitica, IgА, полуколичественно
- Yersinia pseudotuberculosis, Yersinia enterocolitica, IgG, полуколичественно
- Посев на Yersinia spp.
- Посев кала на условно-патогенную флору
- Дисбактериоз кишечника с определением чувствительности к антибиотикам
- E.coli (EPEC, ETEC, EIEC, EHEC, EAgEC), ДНК [реал-тайм ПЦР]
- Копрограмма
- Общий анализ крови (без лейкоцитарной формулы и СОЭ)
- Лейкоцитарная формула
- Скорость оседания эритроцитов (СОЭ)
- Типирование HLA-B27
Кто назначает исследование?
Инфекционист, ревматолог.
Литература
-
Возианова Ж. И. Инфекционные и паразитарные болезни: В 3х т. — К.: Здоровье, 2000 – Т.1.: 458-497.
- Кишкун А. А. Иммунологические и серологические исследования в клинической практике. — М.: ООО МИА, 2006. – 401-404 с.
- Harrison’s Principles of Internal Medicine. 16th ed. NY: McGraw-Hill; 2005: 923-929.
ИЕРСИНИОЗ И ПСЕВДОТУБЕРКУЛЕЗ | Энциклопедия KM.RU
Пятнистая сыпь.
Иерсиниоз и псевдотуберкулез — острые инфекционные заболевания, характеризующиеся токсико-аллергическими проявлениями, полиочаговой симптоматикой, часто поражением желудочно-кишечного тракта и сыпью. Причины возникновения — употребление в пищу различных продуктов, загрязненных выделениями больных животных (чаще грызунов), а также через воду.
Развитие заболевания. При попадании в желудочно-кишечный тракт бактерии проникают в лимфатический аппарат кишечника, чаще в области подвздошной кишки, где накапливаются в лимфатических узлах. Часть из них погибает, выделяя токсины, что ведет к появлению у больных головной боли, слабости, вялости. В ряде случаев из-за увеличения лимфатических узлов и воспалительного процесса в области червеобразного отростка возникают симптомы катарального аппендицита. На этой стадии возможно прекращение развития заболевания. Однако при прорыве лимфатического барьера бактерии поступают в кровь, где, частично погибая, выделяют токсин, частично захватываются клетками-фагоцитами и попадают в различные органы. В пораженных органах образуются очаги инфекции, а иногда и микроабцессы. При генерализации инфекции возможно развитие полиартритов, нефритов, менингитов и т. д. Длительное пребывание бактерий и их токсинов в организме ведет к повышению чувствительности и развитию различных аллергических реакций. После освобождения организма от возбудителя медленно начинает формироваться иммунитет, в связи с чем часто наблюдаются обострения болезни.
Симптомы. Оба заболевания отличаются полиморфизмом клинических проявлений. Продолжительность инкубационного периода при псевдотуберкулезе от 3 до 18 дней, а при иерсиниозе — от 1 до 6 дней. Иерсиниоз чаще протекает в виде поражения желудочно-кишечного тракта, а псевдотуберкулез одинаково часто в локализованной и генерализованной формах. Псевдотуберкулез начинается остро с высокой температуры, слабости, мышечных и суставных болей, потери аппетита. Может быть насморк, боли в горле. Нередки тошнота и рвота, расстройство стула и умеренные боли в животе. У больных появляется покраснение лица, шеи, кистей и стоп. На фоне красного лица выделяется бледная зона носогубного треугольника.
На 1-6 день болезни у больных появляется скарлатиноподобная сыпь, которая бесследно исчезает через несколько дней. Появляются болезненность и припухлость суставов, учащение пульса и снижение артериального давления. Язык «малинового» цвета. Печень и селезенка увеличены. На 2-3 неделе заболевания появляется отрубевидное шелушение кожи на туловище, лице, а на ладонях и стопах более грубое — пластинчатое. При иерсиниозе начало заболевания также острое, но боли в животе сильные, схваткообразного характера, частый жидкий стул, при прощупывании живота часто определяются симптомы аппендицита. При поражении печени возникают симптомы гепатита. Сыпь появляется позднее — на 2-3 неделе болезни; она обильная, локализуется вокруг крупных суставов. При иерсиниозе и псевдотуберкулезе наиболее тяжело протекает генерализованная форма инфекции, которая может привести к смерти больного.
Диагностика. Диагноз ставится на основании характерной клинической симптоматики и подтверждается бактериологическим посевом, а также выявлением специфических антител в серологических реакциях.
Лечение. Показано назначение антибиотиков: левомицетина, тетрациклина, гентамицина, а также антигистаминных средств. В тяжелых случаях назначают кортикостероиды. Применяют поливитамины и противовоспалительные средства (индометацин, бруфен). При аппендикулярной форме возможно хирургическое лечение с проведением в полном объеме антибактериального лечения.
Профилактика. Большое значение имеет борьба с грызунами, контроль за водоснабжением и правильное хранение продуктов питания. Необходимо помнить, что возбудители иерсиниоза и псевдотуберкулеза размножаются при температуре холодильника (2-4 градуса тепла) и часто сохраняются в салатах из свежей капусты.
РПГА с иерсиниозным и псевдотуберкулезным диагностикумом в медицинской лаборатории \»Оптимум\» в Сочи (Адлер)
Бактерии Yersinia — грамотрицательные палочки из семейства Enterobakteriaceae, переносчики инфекции — грызуны. Микроорганизмы поражают пищеварительные органы, Yersinia enterocolitica вызывает кишечный иерсиниоз, Yersinia pseudotuberculosis — псевдотуберкулез (который был назван из-за внешнего сходства клеточных бугорков, обнаруженных в тканях инфицированных животных с «туберкулезной гранулемой»).Бациллы представляют опасность для человека и животных, они обладают высокой устойчивостью к окружающим условиям, накапливаются и размножаются в почве, воде. В человеческий организм бактерии проникают при уходе за инфицированным животным и употреблении сырой воды, немытых овощей и фруктов, плохо приготовленной рыбы и мяса, некипяченого молока.
Клинические проявления кишечного иерсиниоза и псевдотуберкулеза очень похожи:
- диарея;
- лихорадка;
- спастические боли в животе;
- рвота;
- увеличение лимфоузлов;
- катаральные симптомы.
Отличительным признаком псевдотуберкулеза является появление скарлатиноподобных высыпаний в естественных складках (на шее, в подмышках, паху, вдоль торса), отек стоп ног и кистей рук. Именно поэтому заболевание могут называть скарлатиноподобной лихорадкой. Сходство клинико-этиологических характеристик, механизма зарождения и развития болезни позволяет рассматривать кишечный иерсиниоз и псевдотуберкулез как близкие друг другу кишечные инфекции, различить возбудителей инфекционного процесса можно лишь при помощи лабораторных анализов.
Наиболее достоверным методом считается выявление присутствия антител к бациллам в реакции пассивной гемагглютинации (РПГА).
Условно-диагностическим титром считают итог 1:160 и выше — положительный результат, подтверждающий текущее заболевание.
Рекомендуют двукратное проведение анализа — при появлении первых клинических признаков и через неделю. Окончательный диагноз инфекционного процесса устанавливает квалифицированный специалист.
Иерсиниозы. Меры профилактики
16.03.2021Иерсиниозы. Меры профилактики
Иерсиниозы (кишечный иерсиниоз и псевдотуберкулез) – природно-очаговые заболевания, общие для человека и животных. Возбудителем кишечного иерсиниоза является Yersiniaenterocolitica, а псевдотуберкулеза — Yersiniapseudotuberculosis. Эти бактерии способны продолжительно сохраняться в почве, воде, на мясных, молочных, хлебобулочных и других продуктах питания. На овощах и фруктах, в условиях складов, овощехранилищ, холодильников (при длительном хранении в условиях низко-положительных температур +4…+6оС) иерсинии активно размножаются.
Основными хранителями, носителями и переносчиками этих инфекций являются дикие мелкие мышевидные грызуны (мыши, полевки, землеройки), образующие природные очаги инфекций.
В период осенних миграций дикие млекопитающие заносят возбудителей заболеваний в населенные пункты, заселяя животноводческие и птицефермы, склады, овощехранилища, погреба, пищеблоки, подключая к циркуляции иерсиниозов синантропных грызунов (мышь домовая, серая крыса), домашних и сельскохозяйственных животных (кошки, собаки, свиньи, мелкий и крупнорогатый скот, сельскохозяйственная птица). Сами животные обычно заражаются иерсиниозом при поедании кормов, инфицированных возбудителем иерсиниоза, либо при употреблении воды из естественных загрязненных водоемов, либо контактным путем, который чаще всего обусловлен содержанием сельскохозяйственных животных в плохих санитарных условиях.
Бактерии также могут попасть в овощехранилища с овощами и фруктами (без грызунов), будучи инфицированными еще в полях.
Основным механизмом заражения человека иерсиниозами является фекально-оральный, реализующийся при прямом употреблении в пищу инфицированных продуктов питания, реже при использовании загрязненного грызунами оборудования и инвентаря или при уходе за больными животными. При этом, основными источниками заражения при кишечном иерсиниозе являются продукты животного происхождения (молоко, молочные продукты, мясо, мясные полуфабрикаты, птица) и вода, загрязненные испражнениями мелких мышевидных грызунов, либо инфицированные вторично на складах, в холодильниках и не прошедшие достаточной термообработки. При псевдотуберкулезе более эпидемиологически значимыми являются продукты растительного происхождения (овощи, фрукты), инфицированные в полях, при транспортировке или на складах и овощехранилищах, а также блюда из свежих овощей, зелени и фруктов, недостаточно промытых или очищенных, или приготовленных накануне и хранившихся в холодильнике.
Актуальность данной темы подтверждается тем, что в Российской Федерации ежегодно регистрируется 4-5 тысяч заболевших иерсиниозами всех возрастных групп, с 3-4-х кратным преобладанием детей. При кишечном иерсиниозе заболеваемость носит спорадический характер с единичными случаями. незначительным летним подъемом случаев заражения и осенне-зимним обострением. При псевдотуберкулезе чаще регистрируется групповая заболеваемость детей от 3 до 17 лет, связанная с местами общественного питания в детских садах, школах, средних и высших учебных заведениях в зимне-весенний период.
В Алтайском крае в последние годы регистрируется в среднем 45 случаев заболеваний жителей иерсиниозами в год, с преобладанием псевдотуберкулеза. В 2020г. в крае было зарегистрировано 14 случаев заболеваний людей иерсиниозами, что ниже уровня 2019г. (21 человек), и ниже среднемноголетних значений.
Для оценки активности природных очагов иерсиниозов — первоисточников этих заболеваний, зоологической группой ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии в Алтайском крае» ежегодно обследуется 13-16 энзоотичных территорий края. При обследовании территорий, специалистами проводится учет мелких млекопитающих – основных носителей этих инфекций, их отлов и отбор проб биоматериала для лабораторных исследований на природно-очаговые заболевания. Ежегодно лабораторией особо опасных инфекций ФБУЗ исследуется около 500 зверьков, с использованием бактериологических и серологических методов исследования.
За 2020 год была выделена 21 культура Yersiniaenterocolitica от мелких мышевидных грызунов, добытых в 3 районах края и серологически подтверждено наличие антител к возбудителю у 207 животных. Активность природных очагов пришлась на февраль-март.
Динамика активности природных очагов иерсиниозов с 2002 года
Диаграмма
Кроме того, с целью выявления антропургических очагов иерсиниозов в населенных пунктах, специалистами ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии в Алтайском крае» ежегодно проводится отбор проб биоматериала на объектах хранения и реализации пищевой продукции в учреждениях общественного питания дошкольных, школьных, средних и высших учебных заведений, которые исследуются в лабораториях учреждения. За 12 месяцев 2020 г. проведено 1000 исследований материала из объектов внешней среды на иерсиниозы, положительных – 228(22,8%).
В результате полевых эпизоотологических работ и лабораторных исследований 2020 года можно заключить, что
1. Численность мелких мышевидных грызунов – основных носителей природно-очаговых инфекций в предзимний период 2020-2021гг. находится на низком уровне.
2. Учитывая данные 19-ти летнего мониторинга природных очагов иерсиниозов Алтайского края можно отметить, что активность возбудителей этих заболеваний непостоянна и варьирует от 0,2% до 8,8% пораженности диких мелких мышевидных грызунов в год со среднемноголетним показателем 3,76%. В 2020 году этот показатель был равен 5,2%.
Прогноз иерсиниоза:
Прогноз иерсиниоза, в большинстве случаев, благоприятен. Заболевание недолго длится и при своевременном лечении быстро проходит. Летальные исходы чрезвычайно редки. Смерть при иерсиниозе, в основном, бывает обусловлена осложнениями (перитонит, сепсис, кишечная непроходимость, перфорация кишечника, менингоэнцефалит и др.), которые могут развиться в процессе данной болезни.
Профилактика иерсиниоза:
Профилактические мероприятия при иерсиниозе можно разделить на следующие группы:
-мероприятия, связанные с предупреждением инфицирования животных иерсиниями;
-мероприятия, связанные с предупреждением инфицирования продуктов питания иерсиниями;
-противоэпидемические мероприятия.
Мероприятия, связанные с предупреждением инфицирования животных иерсиниями:
Так как животные являются основными источниками иерсиний, то целесообразным направлением в профилактике иерсиниоза является предупреждение инфицирования этих животных данными микробами. В первую очередь, это касается сельскохозяйственных домашних животных, с которыми человек постоянно контактирует и использует в целях продуктового обогащения. Для предотвращения заражения животных, фермерам необходимо строго соблюдать все санитарные и ветеринарные требования и правила ухода за животными, которые указаны в нормативных документах. Эти правила содержат конкретные рекомендации относительно необходимых условий содержаний животных, их кормления, своевременного распознавания иерсиниоза, его лечения, изоляции источника возбудителя. В них также указаны требования по качественной очистке и дезинфекции мест содержания домашних животных, дезинсекции и дератизации помещений, где они обитают, и территорий, которые находятся поблизости фермерского хозяйства.Мероприятия, связанные с предупреждением инфицирования животных иерсиниями, должны включать еще и микробиологический контроль за обсемененностью кормов, используемых для кормления животных. Сотрудники фермерского хозяйства обязаны знать элементарную информацию о иерсиниозе, который является одной из самых распространенных кишечных инфекций.
Мероприятия, связанные с предупреждением инфицирования продуктов питания иерсиниями:
Мероприятия, связанные с предупреждением инфицирования продуктов питания иерсиниями включают в себя санитарный контроль (со стороны соответствующих органов государственного контроля) за состоянием плодовоовощных, молочных, мясных складов, помещений, инструментов и оборудования, необходимого для переработки фруктов, овощей, мяса, молочных продуктов. В эти мероприятия также должен входить санитарный контроль за состоянием транспорта, необходимого для перевозки продуктов питания и первичной материи (еще не переработанных продуктов).Чрезвычайно важным в предотвращении передачи иерсиниоза является соблюдение правильных условий хранения и реализации (температуры, влажности, сроков хранения на складе) продуктов питания. Эти условия закреплены в специальных нормативных документах (ГОСТах).
Для профилактики загрязнения продуктов иерсиниями необходимо проводить своевременные дератизационные действия, направленные на борьбу с грызунами, которые могут служить потенциальными разносчиками различных инфекционных болезней (в том числе и иерсиниоза).
Дератизационные мероприятия обязательно должны проводиться не только на складах, где расположена первичная продукция, но и на территориях предприятий первичной переработки, заведений общественного питания, лечебно-профилактических учреждений, предприятий пищевой промышленности и др. Также нужен бактериологический контроль за обсемененностью иерсиниями грызунов. Этот же контроль применяют для анализа присутствия вредоносных бактерий на поверхности фруктов, овощей, посуды, продуктов обихода, оборудования плодовоовощных баз.
Противоэпидемические мероприятия
Противоэпидемические мероприятия – это комплекс мер, направленных на выявление и ликвидацию эпидемического очага (то есть территории, в которой пребывает источник инфекции и может передавать инфекционное начало другим людям) заболевания. Противоэпидемические мероприятия обычно осуществляются при выявлении сезонных вспышек иерсиниоза среди населения. Они включают активное распознавание больных и носителей (и их изоляцию) в том или ином коллективе (например, среди работников пищеблоков, в столовых которых были выявлены случаи инфицирования у посетителей), взятие продуктов питания на лабораторную экспертизу, смывов с поверхностей, на которых обрабатываются продукты, санитарный осмотр мест хранения продуктов питания. Пристальное внимание в таких случаях уделяют обследованию объекта на предмет поддержания в нем чистоты и обитания грызунов. При выявлении грызунов проводятся соответствующие внеплановые дератизационные мероприятия. В процессе эпидемиологического анализа на объекте, где были зарегистрированы случаи заболеваемости иерсиниозом, запрещается реализация продуктов, не прошедших термическую обработку.
После выявления факторов передачи (то есть элементов внешней среды, посредством которых инфекционный агент передается от источника инфекции к восприимчивому организму) вредоносных бактерий во всех помещениях пищеблока организуется тотальная дезинфекция с обработкой всех рабочих и нерабочих поверхностей, оборудования, пищевой тары, посуды. Переболевших иерсиниозом выписывают из стационарного учреждения (инфекционной больницы) только после полнейшего клинического выздоровления с проведением перед выпиской контрольных бактериологических исследований кала. Дети и подростки, которые перенесли иерсиниоз, направляются на диспансерное наблюдение к участковому педиатру (семейному врачу).
В случае отсутствия признаков рецидивирования (повторения симптоматики заболевания) и осложнений, продолжительность диспансеризации составляет 21 день.
Таким образом, противоэпидемические мероприятия необходимы для предотвращения передачи инфекции от зараженного человека (или носителя) здоровому. Такие мероприятия также способствуют блокированию пищевого пути передачи возбудителя иерсиниоза, что достигается исключением из реализации загрязненных возбудителем продуктов питания и готовых блюд. Следует отметить, что средства специфической профилактики (вакцины) против иерсиниоза не разработаны.
Важной мерой профилактики для населения так же являются следующие простые правила:
-строго соблюдайте условия хранении реализации пищевых продуктов, технологию их приготовления;
-используйте качественную питьевую воду на предприятиях общепита и в быту;
-тщательно мойте овощи, корнеплоды, фрукты, удаляйте все подгнившие участки;
-употребляйте только свежеприготовленные салаты;
-готовые блюда храните отдельно от сырых продуктов.
Основные лабораторные исследования, а также зооэнтомологические экспертизы и дератизационные работы, проводимые ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии в Алтайском крае» с целью диагностики и предупреждения широкого распространения иерсиниозов можно ознакомиться по ссылке.
Что такое иерсиниоз (псевдотуберкулез)?
Диагностика кишечного иерсиниоза
Иерсиниоз (псевдотуберкулез) — бактериальная кишечная инфекция, вызывающая поражение тонкой кишки, аппендикса, лимфатических узлов, поджелудочной железы, печени, общую интоксикацию организма.
Возбудителями иерсиниоза являются бактерии Yersinia enterocolitica, которые во многом схожи с возбудителем псевдотуберкулеза (Yersinia pseudotuberculesa) и относятся к одному семейству с чумной бациллой Yersinia pestis. Заболевания, вызываемые каждым из этих возбудителей, имеют яркую клиническую индивидуальность, эпидемиологические особенности и требуют разного подхода к лечению.
Иерсинии сохраняют жизнедеятельность и размножаются во внешней среде при температуре от 0 до +4 °С, чувствительны к высушиванию, уничтожаются при кипячении, лиофилизации, пастеризации, под воздействием ультрафиолета и дез-средств. Заболеваемость иерсиниозом имеет выраженную осенне-зимне-весеннюю сезонность. Чаще всего болеют дети от 2 до 10 лет.
Эпидемиология заболевания
Иерсиниоз чаще всего диагностируется в городах европейской части РФ, в районах Урала, Сибири и Дальнего Востока.
Переносчиками возбудителя инфекции могут быть мышевидные грызуны (крысы, полевки, пищухи, тушканчики), дикие и домашние животные (собаки, кошки, морские свинки, кролики, хомяки, ежи).
Опасность для человека заключается в том, что иерсинии способны жить и размножаться в пищевых продуктах. Особенно хорошо они сохраняются в свежих овощах — до двух месяцев; а также в хлебе и молоке.
Иерсиниям не страшны условия пониженной температуры холодильника — наоборот, там они размножаются быстрее. Не случайно врачи называют иерсиниоз «болезнью из холодильника».
Основной путь передачи инфекции — фекально-оральный.
Заражение иерсиниозом возможно в следующих случаях:
- — при употреблении инфицированных овощных салатов, молочных и мясных продуктов;
- — длительном хранении контаминированной возбудителем продукции при
- — низкой температуре;
- — нарушении сроков реализации продуктов;
- — недостаточной термической обработке продуктов;
- — неправильном хранении продуктов в холодильниках.
Также возможно заражение от больного человека или носителя, в том числе при манипуляциях с кровью.
Заразиться можно и при разделке мяса животных, тушек птицы, приготовлении по луфабрикатов.
Клиническая картина кишечного иерсиниоза
Инкубационный период заболевания составляет от 1 до 7 дней. Начало кишечной формы — острое.
Для второго дня заболевания характерен частый стул — до 5-7 раз в сутки: чаще жидкий, с зеленью, непереваренными комочками пищи, слизью, редко с прожилками крови. Отмечаются болезненность в околопупочной области, правых отделах живота, метеоризм. На 3-5-е сутки увеличиваютс размеры печени, появляется мезаденит, панкреатопатия, может появиться желтушность кожных покровов и склер. На 2-5-е сутки заболевания возникает полиморфная пятнисто-папулезная, иногда уртикарная сыпь на лице, туловище, сгибательных поверхностях дисталь-ных отделов конечностей и в виде «перчаток-носков», возможны боли в суставах. При исчезновении высыпаний возможна пигментация и мелкопластинчатое шелушение кожи, особенно в области ногтевых фаланг.
У детей 5-7 лет проявления диареи бывают нерегулярными и скудными, а болевой синдром выраженным, что может привести к госпитализации в хирургический стационар в связи с подозрением на аппендицит.
Иногда детей госпитализируют с подозрением на кишечную инфекцию и вирусный гепатит. Заболевание хорошо маскируется и может ввести в заблуждение даже опытного врача.
Вовремя начатая антибактериальная терапия обеспечивает быструю положительную динамику: нормализацию температуры, восстановление-аппетита, прекращение рвоты и жидкого стула.
Первые симптомы иерсиниоза:
- — повышение температуры тела;
- — лихорадка;
- — отсутствие аппетита;
- — частая рвота;
- — беспокойство или заторможенность;
- — бледность кожных покровов;
- — обложенность языка;
- — увеличение лимфоузлов.
Комментарии:
Добавить комментарий
Yersinia Pseudotuberculosis — StatPearls — NCBI Bookshelf
Непрерывное обучение
Yersinia pseudotuberculosis вызывает пищевые инфекции, характеризующиеся самоограничивающимся мезентериальным лимфаденитом, имитирующим аппендицит. В этом упражнении проводится обзор оценки и лечения псевдотуберкулеза иерсинии и подчеркивается роль межпрофессиональной группы в распознавании и лечении этого состояния.
Цели:
-
Объяснить рекомендации по лечению иерсинии псевдотуберкулеза.
-
Опишите типичное представление пациента с псевдотуберкулезной иерсинией.
-
Обзор патофизиологии иерсинии псевдотуберкулеза.
-
Обобщите стратегии межпрофессиональной группы для улучшения координации помощи и коммуникации в отношении лечения псевдотуберкулеза иерсинии.
Введение
Род Yersinia включает группу грамотрицательных палочковидных бактерий, широко распространенных в окружающей среде.Этот род включает 17 различных видов, 3 из которых вирулентны для человека. К ним относятся Yersinia pestis, Yersinia enterocolitica и Yersinia pseudotuberculosis. Известно, что Y. enterocolitica и Y. pseudotuberculosis вызывают кишечные заболевания; однако Y. pseudotuberculosis редко встречается у людей по сравнению с Y. enterocolitica, который встречается чаще. [1] [2] [3]
Этиология
Yersinia pseudotuberculosis обычно передается через употребление зараженных пищевых продуктов и воды.Yersinia pseudotuberculosis присутствует в почве, и ее можно увидеть в свежих сельскохозяйственных культурах и корнеплодах. Он имеет множество резервуаров для животных и изобилует дикой природой, включая птиц, грызунов, кроликов, оленей, собак, кошек и крупный рогатый скот. [2] [4] [5] [4].
Инкубационный период от 5 до 10 дней. Сообщается о латентном периоде от 2 до 20 дней с пиком заболеваемости через 4 дня после приема внутрь.
Эпидемиология
США
Международный
-
Распространение инфекции Yersinia pseudotuberculosis распространяется по всему миру.Большинство случаев происходит зимой из-за улучшения характеристик роста при низких температурах.
-
Эпидемии, вызванные Y. pseudotuberculosis, произошли на Дальнем Востоке России и в Японии во 2-й половине 20-го века, вызвав «Дальневосточную алую лихорадку» (FESLF).
- Y. pseudotuberculosis имеет спорадическое распространение в Европе. [5]
Смертность / заболеваемость
-
Yersinia pseudotuberculosis имеет низкий уровень летальности.Однако от редких заболеваний, связанных с сепсисом, вызванных инфекцией Y. pseudotuberculosis , у пациентов с хроническим заболеванием печени уровень смертности превышает 75%.
Раса
Пол
Возраст
Патофизиология
Энтеропатоген, Yersinia pseudotuberculosis, требует большого посевного материала, чтобы вызвать болезнь. Первичный фактор вирулентности — это кодируемый плазмидой белок, вызывающий повышенную инвазивность. Yersinia pseudotuberculosis выживает внутриклеточно.
Yersinia pseudotuberculosis обитает и растет в желудочно-кишечном тракте, сначала в пейеровых пятнах, а затем распространяется на печень и селезенку через мезентериальные лимфатические узлы или напрямую [2].
Yersinia pseudotuberculosis обладает системой поглощения железа, опосредованной сидерофором, что способствует ее вирулентности. [6] Следовательно, пациенты с нарушениями, связанными с перегрузкой железом, такими как венозный застой, гемохроматоз, цирроз и гемолитические анемии, имеют несколько более высокий риск системных инфекций.[7]
Histopathology
В целом аппендикс выглядит нормальным, но в близлежащих мезентериальных лимфатических узлах и пейеровских бляшках могут быть эпителиоидные гранулематозные поражения, коагуляционный некроз и лимфоидная гиперплазия, что может напоминать туберкулез. В тонкой кишке могут развиваться микроабсцессы, криптическая гиперплазия и укорочение ворсинок. Гранулематозные абсцессы образуются в таких органах, как печень, селезенка, легкие, почки и кишечник, когда организм распространяется во время сепсиса. [8]
История и физические данные
Ю.псевдотуберкулез вызывает самоограничивающийся острый гастроэнтерит и мезентериальный лимфаденит, имитирующий острый аппендицит. Энтерит обычно наблюдается у детей, в отличие от мезентериального аденита у взрослых [5]. Симптомы включают боль в животе, лихорадку, рвоту и диарею. Боль в животе часто локализуется в правом нижнем квадранте и может имитировать аппендицит.
Другие проблемы, связанные с инфекцией Yersinia pseudotuberculosis , включают терминальный илеит и инвагинацию, чаще всего у детей.В большинстве случаев энтероколит длится от одной до трех недель. Могут возникать узловатая эритема, артралгии, реактивный артрит, анкилозирующий спондилит и заболевание пояснично-фасеточных суставов. Споротрихоидный паттерн заболевания был связан с инфекцией Yersinia pseudotuberculosis . Кожные проявления включают эритему лица и шеи, гиперемию конъюнктивы, клубничный язык, точечную кожную сыпь и шелушение. Сообщалось также о таких офтальмологических явлениях, как увеит и конъюнктивит.
Физические признаки, вызванные инфекцией Yersinia pseudotuberculosis , можно разделить на три основные категории: системные, кишечные и ревматологические.
-
Системные признаки включают желтуху, гипотонию и лимфаденопатию
-
Кишечные признаки включают болезненность живота с или без отскока по точке Макберни
-
Ревматологическое поражение включает выпот в суставы, болезненность или уменьшение диапазона движений и, возможно, асимметричный распределение.
Пациенты с иммуносупрессивными состояниями и состояниями перегрузки железом, такими как гемохроматоз, венозный застой, гемолитическая анемия и цирроз печени, подвержены риску сепсиса. [9] [10] [11]
Оценка
Лабораторный диагноз Yersinia pseudotuberculosis требует подтверждения наличия микроорганизма для подтверждения клинического диагноза. Подтверждающим является получение из источников с положительным посевом, таких как кровь, спинномозговая жидкость, перитонеальная жидкость, синовиальная жидкость или биопсия другого органа.[12] [13] Microbiology
-
Yersinia pseudotuberculosis — это грамотрицательная коккобацилла, которая отличается ферментацией сорбита и активностью орнитиндекарбоксилазы, среди прочего. Оптимальный рост происходит на среде МакКонки при температуре от 20 ° C до 35 ° C. Yersinia pseudotuberculosis является аэробным и факультативно анаэробным. Медленно растет на пластинах с кровяным и шоколадным агаром. Он образует маленькие серые и полупрозрачные колонии через 24–72 часа.У него хороший характер роста на чашках с агаром МакКонки или с эозин-метиленовым синим, но он заметно усиливается при температуре ниже 28 ° C, когда он становится подвижным при 25 ° C. Yersinia pseudotuberculosis является оксидазонегативным, продуцирующим каталазу и мочевиной. расщепляет и не ферментирует лактозу.
Стул
-
Изоляция от стула затруднена из-за медленного роста. Урожайность каловых культур может быть увеличена с помощью холодного обогащения, специальных питательных сред или обработки щелочью.
Кровь, перитонеальная и синовиальная жидкости и глоточный экссудат
Серология
-
Иммуноферментный анализ и тесты агглютинации могут быть получены; антитела (против антигена O) могут появиться вскоре после начала болезни и ослабнуть в течение двух-шести месяцев. Были разработаны тесты реакции гемагглютинации, которые обнаруживают пили Yersinia pseudotuberculosis или Yersinia pestis .Титры гемагглютинации 1: 160 или выше предполагают истинную инфекцию.
-
Перекрестная реакция антител с другими организмами может затруднить диагностическую картину. Эти другие организмы включают другие Yersinia, Brucella, Vibrio, Rickettsia и Salmonella.
-
Электрофорез в полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия — надежная серологическая процедура для диагностики инфекции Yersinia pseudotuberculosis или Yersinia enterocolitica .
У пациентов с мезентериальным лимфаденитом компьютерная томография или УЗИ могут выявить увеличенные мезентериальные лимфатические узлы и перитонеальные признаки, включая воспаление аппендикса и терминальный илеит.
При пневмонических или септических проявлениях рентген грудной клетки может выявить инфильтраты, указывающие на острую пневмонию.
При редком варианте болезни Кавасаки, лихорадке Идзуми, отклонения ЭКГ могут указывать на ишемию, если аневризмы нарушают кровообращение в коронарной артерии.Эти отклонения чаще развиваются у детей.
Лечение / ведение
Инфекция Yersinia pseudotuberculosis обычно купируется самостоятельно. Более токсичные проявления, включая септические синдромы или тяжелое обезвоживание, могут потребовать госпитализации. Необходим общий поддерживающий уход. [14] [15]
Хотя антибиотики не требуются при легкой форме заболевания, серьезные проявления, такие как сепсис, возникающие у пациента с иммуносупрессией или хроническим заболеванием печени, требуют применения антибиотиков.[2]
Согласно исследованиям in vitro и in vivo на мышах, препараты группы фторхинолонов оказались наиболее эффективными для лечения Y. pseudotuberculosis. Антибиотики, принадлежащие к другим классам, не могли в значительной степени подавлять рост бактерий по сравнению с фторхинолонами. [16] [17] [18] Тем не менее, антибиотики, такие как ампициллин, цефтриаксон, доксициклин и гентамицин, оказались успешными в лечении Y. pseudotuberculosis и его осложнений после ранее задокументированных отчетов о случаях.[19] [20] [21]
Исследовательская лапаротомия может быть оправдана у пациентов с такими осложнениями, как тяжелое желудочно-кишечное кровотечение и кишечная непроходимость. Однако это вмешательство не является распространенным. [22] [23]
Прогноз
Большинство случаев Yersinia pseudotuberculosis легкие и проходят самостоятельно. У пациентов с ослабленным иммунитетом и пациентов с хроническим заболеванием печени заболевание может привести к летальному исходу [24] [25]. (Уровень III) У этих пациентов может развиться тяжелое заболевание, которое может привести к сепсису и генерализованному поражению кишечника.
Осложнения
- Острый тубулоинтерстициальный нефрит [29] [30]
-
Терминальный илеит
-
Тяжелое желудочно-кишечное кровотечение
-
Инвагинация
5 -
Инвагинация
5 -
Инвагинация
Сепсис
Послеоперационный и реабилитационный уход
Диарея, лихорадка и анорексия могут длиться несколько дней или недель, поэтому пациент должен оставаться в НКО.В этот период рекомендуется внутривенное введение жидкости.
Консультации
Проконсультируйтесь с гастроэнтерологом или хирургом, если необходимы инвазивные диагностические или терапевтические вмешательства. При необычных проявлениях, ревматологических, дерматологических или глазных осложнениях; Следует рассмотреть возможность дополнительной консультации со специалистом-инфекционистом.
Сдерживание и просвещение пациентов
Пациент должен быть осведомлен о пищевой гигиене и о том, что его организм устойчив к холоду.Вакцины нет.
Жемчуг и другие проблемы
-
Yersinia pseudotuberculosis вызывается устойчивыми к холоду бактериями и является редкой причиной болезней пищевого происхождения.
-
Может проявляться самоограничивающимся энтероколитом или псевдоаппендицитом.
-
Несмотря на то, что уровень смертности у здоровых людей низкий, он может быть фатальным для пациентов с ослабленным иммунитетом и пациентов с перегрузкой железом.
-
Тяжелое заболевание лечат фторхинолонами, бета-лактамами и аминогликозидами, которые обычно используются в качестве комбинированной терапии.
Улучшение результатов команды здравоохранения
Поскольку инфекция может имитировать многие другие заболевания, следует проконсультироваться со специалистом по инфекционным заболеваниям, гастроэнтерологом и хирургом. [27] [14] (Уровень III) Медицинские работники на всех уровнях должны информировать население о гигиене пищевых продуктов и правильном приготовлении пищи. Медсестры часто последними обращаются к пациентам в отделении неотложной помощи и при выписке и имеют первостепенное положение, чтобы обучить пациента и его семью правильному питанию.Медсестра также должна проинформировать пациента о признаках и симптомах инфекции, чтобы пациент немедленно обратился за помощью.
Непрерывное обучение / обзорные вопросы
Ссылки
- 1.
- Le Guern AS, Martin L, Savin C, Carniel E. Иерсиниоз во Франции: обзор и потенциальные источники инфекции. Int J Infect Dis. 2016 Май; 46: 1-7. [PubMed: 26987478]
- 2.
- Мартинес-Чаваррия LC, Вадивало В. Инфекция Yersinia pestis и Yersinia pseudotuberculosis: перспектива регуляторной РНК.Front Microbiol. 2015; 6: 956. [Бесплатная статья PMC: PMC4585118] [PubMed: 26441890]
- 3.
- Chouikha I, Hinnebusch BJ. Иерсиния — взаимодействие блох и эволюция пути передачи чумы через членистоногие. Curr Opin Microbiol. 2012 июн; 15 (3): 239-46. [Бесплатная статья PMC: PMC3386424] [PubMed: 22406208]
- 4.
- Santos-Montañez J, Benavides-Montaño JA, Hinz AK, Vadyvaloo V.FEMS Microbiol Lett. 2015 июл; 362 (13): fnv091. [Бесплатная статья PMC: PMC4661780] [PubMed: 26025069]
- 5.
- Амфлетт А. Алая лихорадка на Дальнем Востоке: обзор эпидемиологии, симптоматологии и роли суперантигенного токсина: Yersinia pseudotuberculosis-Derived, вызванный мухоморозом. Форум Infect Dis. 2016 Янв; 3 (1): ofv202. [Бесплатная статья PMC: PMC4728291] [PubMed: 26819960]
- 6.
- Ракин А., Шнайдер Л., Подладчикова О. Жажда железа: альтернативные системы поглощения железа сидерофором в высоковирулентной Иерсинии.Front Cell Infect Microbiol. 2012; 2: 151. [Бесплатная статья PMC: PMC3510459] [PubMed: 23226687]
- 7.
- Стангер К.Дж., МакГрегор Х., Ларсен Дж. Вспышки диареи («зимняя чистка») у отъемных овец породы меринос в юго-восточной Австралии. Aust Vet J. 2018 Май; 96 (5): 176-183. [PubMed: 29691860]
- 8.
- Collins FM. Pasteurella, Yersinia, и Francisella . В: Барон С., редактор. Медицинская микробиология. 4-е изд. Медицинский филиал Техасского университета в Галвестоне; Галвестон (Техас): 1996.[PubMed: 21413268]
- 9.
- Ян X, Пан Дж., Ван Й., Шен X. Системы секреции типа VI представляют новую информацию о патогенных Yersinia . Front Cell Infect Microbiol. 2018; 8: 260. [Бесплатная статья PMC: PMC6079546] [PubMed: 30109217]
- 10.
- Дэвис К.М. Все Yersinia не созданы равными: фенотипическая адаптация к определенным нишам в тканях млекопитающих. Front Cell Infect Microbiol. 2018; 8: 261. [Бесплатная статья PMC: PMC6088192] [PubMed: 30128305]
- 11.
- Аткинсон С., Уильямс П. Факторы вирулентности иерсинии — сложный арсенал для борьбы с защитой хозяина. F1000Res. 2016; 5 [Бесплатная статья PMC: PMC45] [PubMed: 27347390]
- 12.
- Кето-Тимонен Р., Хиетала Н., Палонен Э., Хакакорпи А., Линдстрём М., Коркеала Х. Белки холодного шока: мини-обзор с особым акцентом на Csp-семейство энтеропатогенных иерсиний. Front Microbiol. 2016; 7: 1151. [Бесплатная статья PMC: PMC4956666] [PubMed: 27499753]
- 13.
- Чаухан Н., Вробель А., Скурник М., Лео Дж.Yersinia adhesins: арсенал инфекций. Proteomics Clin Appl. 2016 Октябрь; 10 (9-10): 949-963. [PubMed: 27068449]
- 14.
- Вудман И., Скофилд Дж. Б., Хабуби Н. Гистопатологические модели воспалительного заболевания кишечника: критическая оценка. Tech Coloproctol. 2015 декабрь; 19 (12): 717-27. [PubMed: 26385573]
- 15.
- Мэй А.Н., Пайпер С.М., Бутлис С.С. Инвагинация Yersinia: отчет о болезни и обзор. J Paediatr Child Health. 2014 Февраль; 50 (2): 91-5. [PubMed: 23711231]
- 16.
- Lemaitre BC, Mazigh DA, Scavizzi MR. Отсутствие бета-лактамных антибиотиков и заметная эффективность фторхинолонов при лечении инфекции Yersinia pseudotuberculosis у мышей. Противомикробные агенты Chemother. 1991 сентябрь; 35 (9): 1785-90. [Бесплатная статья PMC: PMC245269] [PubMed: 1952849]
- 17.
- Зайцева Е.А., Шубин Ф.Н., Беседнова Н.Н. [Чувствительность иерсиний псевдотуберкулеза к фторхинолонам и эффективность пефлоксацина при экспериментальном псевдотуберкулезе]. Ж Микробиол Эпидемиол Иммунобиол.1997 сентябрь-октябрь; (5): 49-52. [PubMed: 9432847]
- 18.
- Зайцева Е.А., Шубин Ф.Н., Беседнова Н.Н. [Сравнительное исследование антимикробной активности пефлоксацина, ципрофлоксацина, норфлоксацина и азитромицина в отношении штаммов Yersinia pseudotuberculosis]. Антибиотик Химиотер. 1996 Янв; 41 (1): 19-21. [PubMed: 8762820]
- 19.
- Cormier G, Lucas V, Varin S, Hamelin JP, Tanguy G. Инфекция, вызванная иерсинией псевдотуберкулезом пояснично-фасеточного сустава. Костный сустав позвоночника. 2007 Янв; 74 (1): 110-1.[PubMed: 17197222]
- 20.
- Ратмелл В.К., Аргуин П., Чан С., Ю.А. Бактериемия псевдотуберкулеза и абсцесс селезенки у пациента с инсулиннезависимым сахарным диабетом. West J Med. 1999 Февраль; 170 (2): 110-2. [Бесплатная статья PMC: PMC1305451] [PubMed: 10063398]
- 21.
- Хадоу Т., Эльфарра М., Алаузет С., Гине Ф., Лозневски А., Лев С. Аневризма брюшной аорты, инфицированная Yersinia pseudotuberculosis. J Clin Microbiol. 2006 сентябрь; 44 (9): 3457-8. [Бесплатная статья PMC: PMC1594674] [PubMed: 16954300]
- 22.
- Кимура Дж., Сасаки К. Инфекция, вызванная Yersinia pseudotuberculosis, не поддающаяся лечению антибиотиками: отчет о редком случае. Int J Surg Case Rep.2016; 21: 139-41. [Бесплатная статья PMC: PMC4802195] [PubMed: 27002288]
- 23.
- Srinivasa KG, Vidhya JV, Manohar TM, Naik M. Гемиколэктомия справа при кишечной непроходимости, вызванной Yersinia pseudotuberculosis: гистопатологический сюрприз. Индийский J Surg. 2013 июн; 75 (Дополнение 1): 214-6. [Бесплатная статья PMC: PMC3693322] [PubMed: 24426569]
- 24.
- Ансонг К., Шримп-Ратледж А.С., Митчелл HD, Чаухан С., Джонс МБ, Ким Ю.М., Макатир К., Деатеридж Кайзер Б.Л., Дюбуа Д.Л., Брюер Х.М., Фрэнк Б.К., Макдермотт Д.Э., Метц ТО, Петерсон С.Н., Смит Р.Д., Мотин В.Л., Адкинс Ю.Н. Многоомный системный подход к выяснению механизмов вирулентности Yersinia. Мол Биосист. 2013 27 января; 9 (1): 44-54. [Бесплатная статья PMC: PMC3518462] [PubMed: 23147219]
- 25.
- Нактин Дж., Бивис К.Г. Yersinia enterocolitica и Yersinia pseudotuberculosis. Clin Lab Med.1999 сентябрь; 19 (3): 523-36, vi. [PubMed: 10549424]
- 26.
- Ханну Т., Маттила Л., Нуорти Дж. П., Рууту П., Миккола Дж., Сийтонен А., Лейрисало-Репо М. Реактивный артрит после вспышки инфекции Yersinia pseudotuberculosis серотипа O: 3. Ann Rheum Dis. 2003 сентябрь; 62 (9): 866-9. [Бесплатная статья PMC: PMC1754663] [PubMed: 12922960]
- 27.
- Kaasch AJ, Dinter J, Goeser T., Plum G, Seifert H. Инфекция кровотока и септический артрит Yersinia pseudotuberculosis: отчет о болезни и обзор литературы.Инфекционное заболевание. 2012 Апрель; 40 (2): 185-90. [PubMed: 21789525]
- 28.
- Ларкин Д.Ф., Кафферки М.Т., Юстас П. Индуцированный иерсинией увеит в Ирландии. Br J Ophthalmol. 1988 декабрь; 72 (12): 938-41. [Бесплатная статья PMC: PMC1041626] [PubMed: 3228549]
- 29.
- Фукумото Ю., Хираока М., Такано Т., Хори С., Цучида С., Кикава Ю., Судо М. Острый тубулоинтерстициальный нефрит в сочетании с Yersinia pseudisot. Педиатр Нефрол. 1995 Февраль; 9 (1): 78-80. [PubMed: 7742229]
- 30.
- Иидзима К., Йошикава Н., Сато К., Мацуо Т. Острый интерстициальный нефрит, связанный с инфекцией Yersinia pseudotuberculosis. Am J Nephrol. 1989; 9 (3): 236-40. [PubMed: 2667363]
Инфекция иерсинией, псевдотуберкулезом — обзор
Иерсиниоз
Клинические признаки иерсиниоза варьируются от гастроэнтерита, энтероколита, мезентериального аденита, реактивного артрита до сепсиса (см. Главы 43 и 47). Реципиенты переливания крови или пациенты с перегрузкой железом подвергаются особому риску заражения этой сидерофильной бактерией.
Эпидемиология
Yersinia enterocolitica обитает в желудочно-кишечном тракте ряда млекопитающих, включая грызунов, крупный рогатый скот, овец, свиней, кошек и собак. Зараженные животные, как правило, становятся хроническими носителями и выделяют большое количество бактерий, которые могут загрязнять воду и молочные продукты. Люди заражаются при употреблении в пищу неправильно приготовленного мяса (особенно свинины) или другой зараженной пищи или при контакте с инфицированным домашним животным. В США зарегистрированы вспышки, связанные с молочными продуктами, шоколадом и молоком.Способность Y. enterocolitica расти при 39 ° F (4 ° C) означает, что охлажденное мясо и мясные продукты могут стать мощным источником инфекции. Yersinia enterocolitica Сообщалось о сепсисе после переливания крови, хранившейся более 3 недель при 39 ° F (4 ° C).
Yersinia enterocolitica фенотипически классифицируется на шесть биогрупп, пять из которых (1B и 2–5) считаются патогенами. На основе липополисахаридного поверхностного антигена существует более 57 серогрупп «О», лишь некоторые из которых связаны с заболеваниями человека или животных.В Европе наиболее важна серогруппа O: 3, за ней следует O: 9, тогда как в США, где иерсиниоз встречается реже, преобладает серогруппа O: 8.
Инфекция Yersinia pseudotuberculosis встречается реже. Организм обитает в желудочно-кишечном тракте грызунов, сельскохозяйственных животных и птиц. Случаи инфицирования человека зарегистрированы во всем мире, но, как и в случае с Y. enterocolitica , он наиболее распространен в Северной Европе.
Патогенность
Yersinia enterocolitica и Y.pseudotuberculosis обычно попадает в организм через желудочно-кишечный тракт. Организмы проникают в слизистую оболочку подвздошной кишки через специализированные фолликул-ассоциированные эпителиальные клетки (М-клетки), участвующие в захвате антигена. Прилипание и инвазия эпителиальных клеток требует двух кодируемых хромосом белков, Invasin и Ail. 57 После инвазии бактерии проникают в пейеровы пятна и макрофаги и могут выживать внутриклеточно и размножаться. В пейеровых пятнах организмы экспрессируют Яд А, который защищает их от фагоцитоза.Яд А и Айл способствуют распространению бактерий в регионарные лимфатические узлы. Яд А также способствует адгезии к коллагену, что имеет решающее значение в развитии реактивного артрита при инфекции Y. pseudotuberculosis .
Y. enterocolitica обычно вызывает острый гастроэнтерит, а инфекция Y. pseudotuberculosis вызывает мезентериальный аденит, который может имитировать острый аппендицит. Системное распространение может вызвать сепсис и абсцессы селезенки / печени. Реактивный полиартрит может возникнуть, особенно у HLA-B27-положительных пациентов.Узловатая эритема также является признанным постинфекционным осложнением. Клон Y. pseudotuberculosis , который продуцирует суперантигенный экзотоксин-митоген (YPM), вызывает синдром, подобный токсическому шоку, который называется дальневосточной скарлатиной (или лихорадкой Идзуми в Японии). 58
Профилактика
Профилактика иерсиниоза зависит от хорошего животноводства и осторожных методов забоя. Мясо не следует употреблять в сыром виде и не следует хранить при температуре 39 ° F (4 ° C) в течение длительного времени перед употреблением.Нет эффективной вакцины.
Диагностическая микробиология
Материал для посева включает стул, кровь, лимфатические узлы, абсцессы и образцы пищи. Образцы следует культивировать на крови и агарах МакКонки при температуре 80 ° F (26,7 ° C) в течение 24 часов. Доступна селективная среда ЦИН (цефсулодин, иргасан, новобиоцин).
Холодное обогащение сильно загрязненных образцов, таких как фекалии, включает посев в фосфатно-солевой буфер и инкубацию при 39 ° F (4 ° C) в течение не менее 3 недель.Для уменьшения загрязнения бульон можно обработать гидроксидом калия. Бульон пересевают с недельными интервалами на агаре MacConkey или CIN. Колонии Y. enterocolitica имеют вид «бычьего глаза» на агаре CIN, в то время как колонии Y. pseudotuberculosis меньше на CIN, с темно-красным центром и резкой границей, окруженной полупрозрачной зоной. Подтверждение идентификации обычно осуществляется с помощью биохимических или молекулярных тестов или MALDI-TOF. Серотип Yersinia можно определить с помощью тестов агглютинации на предметных стеклах.Серологический диагноз зависит от демонстрации значительного увеличения серотип-специфических антител. Yersinia pseudotuberculosis редко выделяется с фекалиями.
Клинические проявления
Иерсиниоз включает множество клинических проявлений, включая гастроэнтерит, энтероколит, мезентериальный аденит и реактивный артрит.
Лечение
Yersinia энтерит и мезентериальный аденит, как правило, не требуют антимикробной химиотерапии.Сепсис, внекишечные очаги инфекции и энтерит у пациентов с ослабленным иммунитетом следует лечить противомикробными препаратами, такими как аминогликозиды, хинолоны, тетрациклины или цефалоспорины третьего поколения. Yersinia pseudotuberculosis обычно чувствительна к бензилпенициллину и ампициллину.
Цитотоксический некротизирующий фактор Yersinia pseudotuberculosis (CNFy) переносится на внеклеточные мембранные везикулы в клетки-хозяева
Бактериальные штаммы и условия роста
Yersinia pseudotuberculosis (Корейская коллекция культур ATCC 29833, получена из коллекции http: KCAC 29833) // генный банк.rda.go.kr/eng/uat/uia/actionMain.do)) и Y. pseudotuberculosis YPIII был получен из репозитория ресурсов исследований биозащиты и возникающих инфекций (BEI Resources, США). Штаммы бактерий поддерживали в виде замороженных исходных 20% глицерина при -80 ° C. При необходимости их выращивали на чашках с агаром с бульоном Lysogeny (LB) (BD; Difco, США) при 30 ° C в течение ночи. Из этого одну колонию инокулировали в 5 мл бульона LB и выращивали в течение ночи при 30 ° C при перемешивании (250 об / мин).
Культуры клеток человека
Клетки HeLa, которые мы приобрели в Американской коллекции типовых культур (ATCC; www.atcc.org) культивировали в колбах Т75 в среде Игла, модифицированной Дульбекко (MEM, 1: 1 с бикарбонатом натрия (Life Technologies, США)) с добавлением 10% инактивированной нагреванием фетальной бычьей сыворотки и 100 мкг / мл нормоцина (Invivogen, США). .
Очистка MV
MV очищали, как указано ранее. 26 с небольшими модификациями. Вкратце, 500 мл бактериальных культур выращивали в среде LB при 30 ° C и 250 об / мин в 2-литровых колбах в течение 24 ч (OD600 ~ 2,3). Бактериальные клетки и дебрис удаляли низкоскоростным центрифугированием (5000 × g, 30 мин), и среду стерилизовали, пропуская ее через 0.Фильтр 2 мкм (Millipore, США). Бесклеточную среду концентрировали до ~ 5 мл с использованием фильтра Amicon MWCO 100 кДа (США). Концентрированные MV осаждали ультрацентрифугированием (40000 об / мин, 2 часа, 4 ° C) и суспендировали в 25 мМ HEPES (pH 7,5). Затем их смешивали с OptiPrep (Sigma Aldrich, США) для получения 40% (об. / Об.) Раствора OptiPrep в общем объеме 2 мл. Образцы загружали в ультрацентрифужную пробирку на 13,2 мл, и сверху наслоили растворы OptiPrep с более низкой концентрацией (2 мл [40%], 2 мл [30%], 2 мл [25%], 2 мл [20%]). , 1 мл [15%] и, наконец, 0.5 мл [0%]). Образцы центрифугировали (100000 × g, 16 ч, 4 ° C) в роторе с качающимся ведром, после чего фракции по 1 мл последовательно собирали из верхней части пробирки. Содержание белка в каждой фракции проверяли с помощью 10% гелей трис-глицина SDS-PAGE (Biorad, США). Смежные фракции со сходным белковым профилем объединяли, разбавляли 25 мМ HEPES (pH 7,5) и выделяли ультрацентрифугированием (100000 × g, 2 часа, 4 ° C). Затем извлеченные гранулы ресуспендировали в 25 мМ HEPES (pH 7.5) и концентрацию MV, определенную с помощью анализа Брэдфорда.
ТЕМ-анализ бактерий и MV
Для ТЕМ-изображений 2 мкл очищенных MV или бактериальной культуры помещали на покрытые углеродом сетки (Polysciences, Inc., США). Образцы обрабатывали 2,5% глутаровым альдегидом в течение 1 ч, последовательно промывали увеличивающимся количеством этанола (40%, 50%, 60%, 80%, 90% и 100%) и, наконец, абсолютным ацетоном. Затем образцы отрицательно окрашивали 0,1% уранилацетатом и исследовали под просвечивающим электронным микроскопом (JEOL 1200 EX, США).
Протеомный анализ
Yersinia pseudotuberculosis MVДля идентификации белков внутри MV трижды образцы культур Y, псевдотуберкулеза ATCC 29833 и YPIII подвергали расщеплению в геле. Для этого 10 мкг MV (на основе анализа Брэдфорда) разделяли на 10% гелях трис-глицина SDS-PAGE (Biorad, США). После окрашивания кумасси синим каждую дорожку разрезали на шесть частей, и белки в каждой подвергали триптическому расщеплению в геле, как описано Шевченко и соавторами 41 .Полученные триптические пептиды анализировали с помощью LC-MS / MS. Все масс-анализы были выполнены на LTQ-Orbitrap (Thermo, Бремен, Германия), оборудованном источником ионов наноэлектроспрея. Для разделения смеси пептидов мы использовали колонку для ВЭЖХ с обращенной фазой C18 (150 мм × 75 мкм внутренний диаметр) с градиентом ацетонитрил / 0,1% муравьиной кислоты от 10 до 24% в течение 90 мин при скорости потока 300 нл / мин.
Для анализа MS / MS, MS-спектры сканирования ионов предшественников (m / z 400–2000) были получены в Orbitrap с разрешением 60 000 при m / z 400 с внутренней стопорной массой.20 наиболее интенсивных ионов были изолированы и фрагментированы в линейной ионной ловушке путем столкновительной диссоциации (CID). Все образцы МС / МС анализировали с помощью Sequest (Thermo Fisher Scientific, Сан-Хосе, Калифорния, США; версия 1.4.1.14) и X! Тандем (The GPM, thegpm.org; версия CYCLONE (2010.12.01.1)). Секвестр и Х! Тандем был настроен для поиска в базе данных последовательностей белков Y. pseudotuberculosis (9823 записи, UniProt (http://www.uniprot.org/)), предполагая переваривание трипсином. Секвестр и Х! Поиск тандема проводился с допуском по массе ионов фрагмента 0.60 Да и толерантность к исходным ионам 10,0 ppm.
Каркас(версия Scaffold_4.4.3, Proteome Software Inc., Портленд) использовали для проверки идентификации пептидов и белков на основе МС / МС. Идентификация белков принималась только в том случае, если они могли быть установлены с вероятностью более 99,0% для достижения уровня ложного обнаружения менее 1,0% и содержали по крайней мере два идентифицированных пептида. Вероятности белков были определены алгоритмом Protein Prophet. Белки, которые содержали аналогичные пептиды и не могли быть дифференцированы только на основании анализа MS / MS, были сгруппированы в соответствии с принципами экономии.Белки были аннотированы терминами генной онтологии, которые были получены из базы данных NCBI (загружена 1 августа 2016 г.). Локализацию идентифицированных белков определяли вручную с помощью программы прогнозирования субклеточной локализации бактериальных белков PSORTB v. 3.0 28 .
Клонирование и экспрессия CNFy с меткой His
Ген, кодирующий токсин CNFy в геноме Y. pseudotuberculosis YPIII, был амплифицирован с помощью ПЦР с использованием праймеров CNF-F (5′-TAT TCTAGA 3 ) и CNF-R (5′-ATA CTCGAG AAAGTCTTTTTGTAAAACATTAAAC-3 ‘).Эти праймеры вводили сайты рестрикции для Xba 1 и Xho 1 (подчеркнутые области в праймерах, соответственно). Полученный продукт ПЦР расщепляли с использованием этих ферментов, лигировали с pET-31b + для создания 6X слияния his-Tag и трансформировали в E. coli DH5α. После подтверждения правильности вставки эту плазмиду (pET31B + CNFy) очищали и трансформировали в Y. pseudotuberculosis YPIII.
Очистка CNFy
Y.pseudotuberculosis YPIII, несущий pET31B + CNFy, выращивали в среде LB с добавлением 100 мкг / мл ампициллина. Когда OD культуры достигла 1,0, клетки собирали центрифугированием при 5,752 × g (15 мин), промывали PBS и затем суспендировали в буфере для лизиса (50 мМ Tris-HCl pH 7,5; 200 мМ NaCl) с добавлением лизоцима ( 1 мг / мл). Эту суспензию выдерживали на льду в течение 30 минут перед обработкой ультразвуком (амплитуда 20% для 30-секундных импульсов). После обработки ультразвуком остатки клеток удаляли центрифугированием при 5,752 × g в течение 30 мин при 4 ° C.Рекомбинантный CNFy (rCNFy) затем очищали с помощью аффинной хроматографии с использованием гранул Ni-NTA агарозы (Qiagen, США) в соответствии с протоколом, предложенным производителем. Затем очищенный белок количественно определяли с помощью анализа Брэдфорда. Чтобы подтвердить, что белок был чистым, образец отделяли с использованием 10% геля SDS PAGE и визуализировали после окрашивания коллоидным кумасси (фиг. S7). Экспрессия rCNFy в пределах Y. pseudotuberculosis YPIII была также подтверждена вестерн-блоттингом с использованием набора Penta · His HRP Conjugate Kit от Qiagen (США) (рис.2С).
Полуколичественный анализ CNFy в MV с использованием вестерн-блоттинга
Образцы, содержащие 10 мкг белка из целых клеток или MV из Yersinia pseudotuberculosis YPIII pET31b-CNFy, разделяли на 4-20% гелях трис-глицина SDS-PAGE ( Биорад, США). Образцы очищенного rCNFy (0,2 мкг, 0,1 мкг и 0,05 мкг) также обрабатывали на том же геле. Затем белки подвергали электроблоттингу на поливинилидендифторидной (PVDF) мембране (GE healthcare, США) с помощью полусухого трансблоттера (Biorad, США).Затем мембрану инкубировали в течение 2 ч в блокирующем растворе (5% мас. / Об. Обезжиренного молока (Difco, США) в трис-буферном солевом растворе (TBS; 20 мМ Трис-HCl буфер (pH 7,6), содержащий 137 мМ NaCl). три последовательных промывки TBS, мембрану зондировали конъюгатом Penta · His-HRP (Qiagen, США) в течение 2 ч с использованием 5% обезжиренного молока в TBS. Затем блот трижды промывали TBST (TBS, содержащий 0,05% (об. / об.) Tween-20). Затем сигналы проявляли с помощью набора Supersignal West Femto (Thermo Scientific, США) в соответствии с протоколом, предложенным производителем, и регистрировали с помощью системы LAS 200 (GE Healthcare, США).
Иммуноокрашивание и конфокальная микроскопия
Для проверки клеток HeLa на наличие каких-либо морфологических изменений, индуцированных после воздействия МВ, сливающиеся монослои готовили на покровных стеклах Labtek ™ II (Nunc, Германия). Перед обработкой , т.е., добавлением MV, клетки HeLa голодали по сыворотке не менее 20 часов. Затем клетки обрабатывали очищенными MV в течение 12 часов, затем промывали DPBS и фиксировали 3,7% параформальдегидом (в PBS) в течение 20 минут при комнатной температуре.После фиксации клеток их промывали DPBS и повышали проницаемость 0,1% Triton X-100 (Sigma Aldrich, США) в DPBS в течение 5 мин. Затем актиновый цитоскелет окрашивали раствором фаллоидина родамина (0,5 мкг / мл в DPBS; Invitrogen, США) в течение 30 мин при комнатной температуре. После повторной промывки клеток DPBS клеточную ДНК подвергали обратному окрашиванию DAPI (1 мкг / мл в PBS) (Life Technologies, США) в течение 5 мин при комнатной температуре. Затем эти клетки визуализировали с помощью лазерного конфокального микроскопа LSM 780 (Carl Zeiss, Германия), а полученные изображения обрабатывали с помощью программного обеспечения Zen 2009.
Количественная оценка многоядерности
Для определения степени многоядерности клетки HeLa высевали в 96-луночные планшеты для тканевых культур (10000 клеток / лунку) (Corning, США) и инкубировали в течение 24 часов с 5% CO 2 . Затем клетки инкубировали с различными концентрациями либо MV, либо очищенного CNFy в течение 48 часов в атмосфере 5% CO 2 . После этого этапа инкубации клетки промывали DPBS (Sigma-Aldrich, США) и фиксировали 3,7% параформальдегидом (в PBS) в течение 10 мин при комнатной температуре.После трехкратной промывки фиксированных клеток DPBS их контрастировали DAPI (1 мкг / мл в PBS) (Life Technologies, США) в течение 5 мин при комнатной температуре. Затем клетки визуализировали с помощью лазерного конфокального микроскопа LSM 780 (Carl Zeiss, Германия), а полученные изображения обрабатывали с помощью программного обеспечения Zen 2009. Количество многоядерных клеток из конфокальных изображений подсчитывали визуально и использовали для расчета процента.
Визуализация MV, связанных с клетками HeLa
MV были очищены из культур Y.pseudotuberculosis ATCC 29833 и YPIII, как описано выше, а затем метили октадецилродамина B хлорид (R18) (0,5 мкг / мл в DPBS; Invitrogen, США) в течение 20 мин. После окрашивания любой несвязанный краситель удаляли ультрацентрифугированием при 40000 об / мин в течение 2 часов. Монослои клеток HeLa готовили в 8-луночных планшетах с камерами Nunc Lab-Tek II (Thermo Scientific, США), высевая 2 × 10 4 клеток HeLa / лунку и инкубируя их в инкубаторе CO 2 при 37 °. C в течение 24 ч.Для начала эксперимента 0,5 мл окрашенных родамином BR-18 MV (10 мкг / мл в MEM) добавляли в лунки и планшет инкубировали в течение 2 ч при 37 ° C, прежде чем клетки HeLa были промыты DPBS. Затем клетки фиксировали 3,7% параформальдегидом (в PBS) в течение 20 мин при комнатной температуре, промывали PBS и пермеабилизировали раствором 0,1% Triton X-100 (Sigma Aldrich, США) в PBS в течение 5 мин.
Для визуализации клеток HeLa актиновый цитоскелет окрашивали с использованием фаллоидина Alexa Fluor 488 (0.5 мкг / мл в DPBS; Thermo Scientific, США) в течение 30 мин при комнатной температуре. После отмывки клеток DPBS клеточную ДНК подвергали обратному окрашиванию DAPI (1 мкг / мл в PBS; Thermo Scientific, США) в течение 5 мин при комнатной температуре. Затем клетки и МВ визуализировали с помощью лазерного конфокального микроскопа (LSM 780; Carl-Zeiss, Германия). Изображения обрабатывались с помощью программного обеспечения Zen (Carl-Zeiss, Германия).
Анализы жизнеспособности клеток
Влияние MV на жизнеспособность культивируемых клеток HeLa определяли с использованием анализа МТТ в соответствии с протоколом, предложенным производителем.Вкратце, 1 × 10 4 клеток высевали в лунки 96-луночного планшета и выращивали в течение 24 часов. Затем клетки подвергали действию MV из Y. pseudotuberculosis ATCC 29833 или YPIII путем замены среды в лунках свежей средой, содержащей MV. Клетки выращивали в течение дополнительных 24 ч в присутствии MV. После этого в каждую лунку добавляли 5 мкг / мл 3- (4,5-диметил-2-тиазолил) -2,5-дифенил-2H-тетразолийбромида (реагент МТТ, Life Technologies, США) и планшеты инкубировали при еще 4 часа при 37 ° C в темноте.После тщательного удаления среды в каждую лунку добавляли 400 мкл ДМСО и планшет инкубировали при встряхивании (150 об / мин) при комнатной температуре в течение 15 минут, чтобы дать возможность проявиться окраске. OD измеряли при 550 нм и использовали в качестве показателя жизнеспособности клеток HeLa.
Живые / мертвые изображения
Живые и мертвые клетки метили с использованием двух красителей, кальцеина AM и гомодимера этидия-1 (EthD-1), соответственно. Для этого культуры клеток HeLa получали высевом 1 × 10 4 клеток / лунку в 96-луночные планшеты и выращивали, как указано выше.Через 24 часа клетки обрабатывали либо только средой, либо средой, содержащей MV, очищенные от культур Y. pseudotuberculosis ATCC 29833 или YPIII. После того, как клетки выращивали в течение дополнительных 24 часов в присутствии MV, их осторожно промывали 1-кратным фосфатно-солевым буфером Дульбекко (DPBS) при комнатной температуре. В каждую лунку добавляли 100 мкл смеси реагентов Live / Dead Assay (содержащих 1 мкМ кальцеина AM и 2 мкМ EthD-1 (Life Technologies, США)). После 10 мин инкубации при комнатной температуре клетки наблюдали с помощью конфокальной микроскопии (LSM 700; Carl Zeiss, Германия).
Статистический анализ
Данные выражены как среднее (среднее) по крайней мере трех независимых повторов со стандартными отклонениями, показанными как планки ошибок. Для анализа данных использовался непарный t-критерий Стьюдента. Статистически значимыми считались значения P <0,05.
Распространенность и разнообразие Yersinia pseudotuberculosis у диких кабанов на северо-востоке Германии
РЕЗЮМЕ
В этом исследовании была определена распространенность Yersinia pseudotuberculosis у диких кабанов на северо-востоке Германии.Для этого были взяты образцы миндалин 503 кабанов. Наличие Y. pseudotuberculosis изучали с помощью диагностической ПЦР. Положительные образцы анализировали путем культурального обнаружения с использованием модифицированного протокола холодного обогащения. Были получены десять изолятов Y. pseudotuberculosis, которые характеризовали биотипированием, молекулярным серотипированием и мультилокусным типированием последовательностей (MLST). Кроме того, были проанализированы полногеномные последовательности и антимикробная чувствительность изолятов. Yersinia pseudotuberculosis изолировали от самцов и самок животных, большинство из которых были моложе 1 года.Распространенность 2% (10/503) была определена путем культурального обнаружения, в то время как 6,4% (32/503) животных были положительными с помощью ПЦР. Изоляты принадлежали к биотипам 1 и 2 и серотипам O: 1a ( n = 7), O: 1b ( n = 2) и O: 4a ( n = 1). Анализ MLST выявил три типа последовательностей: ST9, ST23 и ST42. За исключением одного изолята, все изоляты показали сильную устойчивость к колистину. Взаимосвязь изолятов была изучена с помощью полногеномного секвенирования, показавшего, что они принадлежат к четырем кладам, демонстрируя пять различных моделей рестрикции с помощью гель-электрофореза в импульсном поле (PFGE) и разнообразный состав генов вирулентности.Шесть изолятов содержали плазмиду вирулентности pYV. Помимо двух изолятов, все изоляты содержали гена и inv , а также полный или неполный остров высокой патогенности (HPI). Ни у одного из них не было гена суперантигена YPM. Исследование показывает, что различные штаммы Y. pseudotuberculosis существуют у диких кабанов на северо-востоке Германии, что может представлять опасность для человека.
ВАЖНОСТЬ Yersinia pseudotuberculosis — это патоген пищевого происхождения, возникновение которого недостаточно изучено.Одна из причин такой ситуации — сложность выделения вида. Методы, разработанные для выделения Yersinia enterocolitica, плохо подходят для Y. pseudotuberculosis. Поэтому мы разработали протокол, который позволил изолировать Y. pseudotuberculosis из относительно высокой доли ПЦР-положительных миндалин дикого кабана. Исследование показывает, что кабаны на северо-востоке Германии могут быть носителями различных штаммов Y. pseudotuberculosis, которые различаются по своему патогенному потенциалу и другим свойствам.Поскольку кабаны широко распространены в лесах Германии и даже населяют такие города, как Берлин, они могут передавать иерсинии другим животным и сельскохозяйственным растениям и, таким образом, вызывать инфекции среди людей через употребление зараженной пищи. Следовательно, распространенность Y. pseudotuberculosis следует определять также у других животных и регионов, чтобы больше узнать о естественных резервуарах этого вида.
ВВЕДЕНИЕ
Yersinia enterocolitica и Yersinia pseudotuberculosis являются энтеропатогенными видами, вызывающими заболевания, называемые иерсиниозом (1).Все патогенные штаммы Yersinia обладают плазмидой вирулентности pYV размером 70 т.п.н., содержащей гены внешних белков Yersinia (YOP) и систему секреции типа III (T3SS) (2). Другие гены вирулентности расположены на хромосомах бактерий (3), но состав генов вирулентности различен у трех видов и может варьироваться между штаммами одного и того же вида.
Иерсиниоз является третьим по распространенности бактериальным энтеритом в Германии и других странах Европы (4). Клинические проявления проявляются диареей, болями в животе и лихорадкой и чаще встречаются у маленьких детей (5).Заболевание в основном вызывается Y. enterocolitica, тогда как Y. pseudotuberculosis зарегистрировано лишь относительно немного случаев иерсиниоза. Причинами этого могут быть слабая осведомленность о Y. pseudotuberculosis как возбудителе гастроэнтерита, сложность культурного выявления этого вида и различные резервуары Y. enterocolitica и Y. pseudotuberculosis. Возникновение Y. enterocolitica тесно связано со свиньями. Заражение этим видом в основном вызывается употреблением зараженной свинины (6–10).Y. pseudotuberculosis имеет более разнообразный спектр хозяев. Это не только патоген для человека, но также он может инфицировать домашний скот и домашних животных, а также зоопарков и диких животных (11–16). По этой причине Y. pseudotuberculosis может иметь большое значение в связи с растущим интересом к продуктам нетрадиционного производства (например, к мясу дичи и выращиванию домашних свиней на открытом воздухе). В Германии (сезон охоты 2015–2016 гг.) Вылов кабанов составило 8 846 тонн. Кроме того, было импортировано около 2200 тонн мяса кабана (17).Поскольку охотники могут продавать дичь в небольших количествах напрямую без контроля официальных ветеринаров, а патогенные штаммы Y. enterocolitica уже выделены из дичи (18–21), потребление мяса кабана и продуктов из этого мяса может вызвать затруднения. риск для потребителей. Тем не менее, в настоящее время имеется лишь немного данных о распространенности Y. pseudotuberculosis среди диких животных, особенно в Германии. Сообщалось, что 62,6% из 763 кабанов содержали антитела против Yersinia, что позволяет предположить, что Y.псевдотуберкулез может существовать у немецких кабанов (22). В Испании распространенность 25% в образцах миндалин была определена с помощью ПЦР (23). Комбинация культивирования и ПЦР-анализа использовалась для определения распространенности Y. pseudotuberculosis в миндалинах, илеоцекальных лимфатических узлах и фекалиях диких кабанов в Швеции. В целом 20% животных дали положительный результат на этот вид (24). В Швейцарии исследованы миндалины и фекалии 153 кабанов (20). Авторы выявили Y. pseudotuberculosis с помощью ПЦР и культивирования у 20% и 3% животных соответственно.Положительными оказались только миндалины, а не кал. Это показывает, что изоляция этого вида затруднена из-за отсутствия надежного метода культурного обнаружения. Стандарт ISO 10273: 2017 (Европейский комитет по стандартизации, 2017), который направлен на культурное обнаружение патогенного Y. enterocolitica, был недавно пересмотрен, но эти два вида слишком различаются, чтобы можно было использовать этот метод для выделения Y. .. псевдотуберкулез. Таким образом, цель этого исследования заключалась в том, чтобы изолировать Y. pseudotuberculosis от диких кабанов с помощью усовершенствованной методологии выделения и подробно охарактеризовать изоляты.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
Улучшение протокола культурального выявления Y. pseudotuberculosis. Хотя холодное обогащение в сочетании с щелочной обработкой (20 секунд в 0,25% или 0,5% растворе гидроксида калия [КОН]) использовалось в нескольких случаях. В исследованиях Y. pseudotuberculosis (11, 25–27) некоторые авторы сообщают о повышенной чувствительности этого вида к КОН (28–30). Мы проанализировали чувствительность к KOH семи штаммов, принадлежащих к пяти серотипам (O: 1a, O: 1b, O: 3, O: 4 и O: 5), некоторые из которых являются наиболее распространенными серотипами в Европе (31).Все штаммы показали очень похожую и сильную чувствительность к 0,25% КОН. Уже после обработки в течение 5 с количество жизнеспособных клеток ночных культур снизилось более чем на 4 log10 (рис. 1). Затем мы определили восприимчивость Y. pseudotuberculosis к КОН в миндалинах дикого кабана с шипами. Гомогенаты миндалин трех кабанов, у которых был отрицательный результат теста на Y. pseudotuberculosis, инокулировали 10 6 , 10 7 и 10 8 КОЕ / мл. Без обработки КОН, Y.псевдотуберкулез можно было легко обнаружить на чашках с агаром цефсулодин-иргасан-новобиоцин (CIN). После обработки КОН в течение 5, 10 или 15 с Y. pseudotuberculosis был обнаружен только в некоторых образцах, особенно в тех, которые содержат большое количество бактерий (Таблица 1). На чувствительность к КОН существенно не влияли биотип, серотип или тип мультилокусной последовательности (MLST) штаммов. Согласно ISO 10273: 2017 бактерии необходимо обрабатывать в течение 20 ± 5 с однодневным раствором КОН (0,5%). Это указывает на то, что лечение КОН является важной процедурой, поэтому она не была включена в исследование распространенности.
Рис. 1.Влияние 0,25% КОН на выделение семи штаммов Y. pseudotuberculosis. Показаны средние значения всех штаммов (серотипы O: 1a, O: 1b, O: 3, O: 4 и O: 5). Эксперименты проводили в трех экземплярах; столбцы указывают на стандартные отклонения.
ТАБЛИЦА 1Выделение Y. pseudotuberculosis из миндалин дикого кабана после обработки КОН (0,25%) a
Исследования, недавно проведенные со штаммами 49 Y. pseudotuberculosis, показали, что в течение первых 7 дней бактерии росли относительно быстро. LB при 1 ° C (конечная оптическая плотность при 600 нм [OD 600 ] 0.От 2 до 0,5), тогда как после этого рост был намного медленнее (32). Мы исследовали рост 16 штаммов Y. pseudotuberculosis (серотипы от O: 1 до O: 5) из нашей коллекции штаммов в среде пептон-сорбитол-желчная соль (PSB) при 4 ° C в течение 14 дней. Аналогичное количество Yersinia было получено после культивирования в течение 7 дней и в конце эксперимента (данные не показаны). По этой причине все образцы, взятые в исследовании распространенности, были инкубированы только в течение 1 недели.
СредаPSB лучше подходит для холодного обогащения, чем модифицированная среда Раппапорта (MRB) и бульон иргасан-тикарциллин-хлорат (ITC) (11, 26, 31).Мы хотели выяснить, усиливает ли стадия предварительной инкубации при комнатной температуре перед холодным обогащением рост Y. pseudotuberculosis, что могло бы облегчить его обнаружение. На рис. 2 показано, что предварительная инкубация в PSB при комнатной температуре в течение 6 ч сильно способствовала росту Y. pseudotuberculosis. Через 7 дней преинкубированная культура содержала примерно на три порядка больше клеток, чем культура без предварительной инкубации. Подобные различия наблюдались через 10 дней.Возможно, что предварительная инкубация повысила приспособленность бактерий и может быть полезной для изоляции Y. pseudotuberculosis. Поэтому этот дополнительный этап был включен в исследование распространенности.
FIG 2Рост Y. pseudotuberculosis при 4 ° C с предварительной инкубацией при комнатной температуре и без нее. Показаны средние значения (КОЕ / мл) для 16 штаммов Y. pseudotuberculosis (серотипы от О: 1 до О: 5); столбцы указывают на стандартные отклонения. д, дней.
Распространенность Y.pseudotuberculosis у диких кабанов. Пятьсот три миндалин были исследованы с помощью ПЦР, нацеленной на ген wzz . В 32 образцах (6,4%) Y. pseudotuberculosis был обнаружен методом ПЦР. Все положительные образцы были использованы для холодового обогащения бактерий, что привело к выделению 10 изолятов, что соответствует распространенности 2% ( n = 10). Распространенность 2%, определенная культурным выявлением, хорошо согласуется с данными (3%), полученными из Швейцарии (20). Напротив, в швейцарском исследовании с помощью ПЦР была получена гораздо более высокая распространенность (20%).Несоответствие между нашими и швейцарскими данными может быть вызвано разными протоколами, которые применялись для выделения Y. pseudotuberculosis, но также возможно, что другие факторы (например, методология ПЦР) объяснили это. Семь изолятов были получены от самцов диких кабанов, а шесть изолятов — от животных моложе 1 года (таблица 2). Пол и возраст исследованных животных хорошо соответствуют всем кабанам, отстреленным в этом регионе в 2015 и 2016 годах (всего 9433) (33).Известно, что с возрастом рост антител против иерсинии связан с приобретением иммунитета (22), поэтому старые кабаны несут меньше иерсиний, чем молодые животные. Кроме того, передача Y. pseudotuberculosis другим диким кабанам может быть ограничена их крупномасштабной средой обитания и тем фактом, что кабаны живут в небольших эхолотах.
ТАБЛИЦА 2Распространенность Y. pseudotuberculosis у диких кабанов в Германии
Типирование и устойчивость изолятов к противомикробным препаратам.Молекулярное серотипирование, проведенное с помощью ПЦР, показало, что семь изолятов принадлежали к серотипу O: 1a, а два и один — к серотипам O: 1b и O: 4a, соответственно (см. Рис. S1 в дополнительном материале). Серотипы O: 1a и O: 1b наиболее распространены в Европе, Австралазии и Северной Америке (34), а серотип O: 1 является одним из серотипов, который связан с инфекциями диких кабанов, свиней и людей (19 , 35). Изоляты были отнесены к биотипам 2 ( n = 7) и 1 ( n = 3), но не было заметной связи между биотипом и серотипом.Точно так же, хотя семь изолятов были классифицированы как тип последовательности 42 (ST42), они принадлежали к разным био- / серотипам (1 / O: 1a, 2 / O: 1a и 2 / O: 1b) (таблица 3). Остальные изоляты были отнесены к ST9 ( n = 2) и ST23 ( n = 1).
ТАБЛИЦА 3Гены происхождения, типирования и вирулентности изолятов Y. pseudotuberculosis
Определение устойчивости к противомикробным препаратам (см. Таблицу S1) показало, что изоляты были чувствительны к большинству противомикробных препаратов. Один изолят (M129) проявил менее выраженную чувствительность к азитромицину, чем другие изоляты.Четыре изолята демонстрировали рост при концентрациях триметоприма от 1 мкг / мл до 2 мкг / мл. Однако наиболее важным открытием было то, что, за исключением одного изолята (M489), все изоляты росли в присутствии высоких концентраций сульфата колистина (> 16 мкг / мл). Фенотип колистина не дикого типа уже описан для Y. pseudotuberculosis (36, 37), но не для Y. enterocolitica. Поиск генов устойчивости к противомикробным препаратам в полногеномных последовательностях изолятов с помощью анализа ResFinder 3.0 (https: // cge.cbs.dtu.dk/services/ResFinder/) (38) не приводило ни к каким совпадениям (данные не показаны). Сообщалось, что, за исключением внешней мембраны, у Y. pseudotuberculosis не существует естественных механизмов устойчивости к противомикробным препаратам (39). Таким образом, нечувствительность к колистину может быть объяснена мутациями в генах, ответственных за состав липополисахаридов (ЛПС). Поскольку колистин в основном используется для лечения инфекций, вызванных устойчивыми к карбапенемам или производящими β-лактамазу расширенного спектра (БЛРС) Enterobacteriaceae, он не играет важной роли для Y.псевдотуберкулез.
Содержание гена вирулентности. 10 изолятов Y. pseudotuberculosis были проанализированы на наличие генов вирулентности, расположенных на хромосоме или плазмиде pYV (таблица 3). Кодируемые pYV внешние белки Yersinia (Yops) защищают бактерии от иммунной системы хозяина и способствуют пролиферации и распространению патогена (40). Они обладают токсическим действием и секретируются в эукариотические клетки системой секреции типа III (T3SS). YadA представляет собой кодируемый pYV связывающий коллаген белок, важный для аутоагглютинации, прикрепления к эпителиальным клеткам и устойчивости сыворотки, тогда как virF является активатором транскрипции.Гены yadA и virF были идентифицированы в шести изолятах Y. pseudotuberculosis, и из них был выделен pYV (данные не показаны). Более того, культивирование изолятов на агаре конго красный с оксалатом магния (CR-MOX) при 37 ° C выявило крошечные красные колонии, что свидетельствует о том, что область кальциевого ответа pYV была функциональной. В четырех изолятах pYV не был обнаружен с помощью ПЦР или полногеномного секвенирования (WGS). Кроме того, рост этих изолятов на CR-MOX при 37 ° C показал, что они не содержат pYV.Не исключено, что четыре pYV-отрицательных изолята потеряли свою плазмиду вирулентности при культивировании в лаборатории, поскольку pYV, как известно, является довольно нестабильной плазмидой (41, 42). Штаммы, лишенные pYV, считаются непатогенными, хотя pYV-отрицательные штаммы Y. pseudotuberculosis были изолированы от пациентов (1, 43).
Энтеропатогенные иерсинии несут на своих хромосомах гены и (локус инвазии прикрепления) и inv (инвазин), которые способствуют адгезии и инвазии в эукариотические клетки (44). ail и inv были обнаружены в девяти изолятах; только один изолят (M102) не содержал этих генов. У Y. pseudotuberculosis отсутствие обоих генов довольно необычно (45). Возможно, что изолят M102 потерял способность проникать в эпителиальный слой и, следовательно, может быть штаммом с пониженной вирулентностью (46–49). Yersinia pseudotuberculosis — одна из немногих грамотрицательных бактерий, продуцирующих суперантигенный токсин (YPM), роль которого в патогенезе обсуждалась (50–52). Существует три варианта гена суперантигена ( ypmA , ypmB и ypmC ) (53).Однако в этом исследовании ген ypm не был обнаружен ни в одном изоляте Y. pseudotuberculosis. Этот результат согласуется с наблюдениями в исследованиях, показывающих, что гены ypm редки в европейских изолятах Y. pseudotuberculosis (51), особенно те, которые принадлежат к серотипам O: 1a и O: 1b, которые преобладали в этом исследовании.
Подобно YPM, остров высокой патогенности (HPI) тесно связан с симптомами иерсиниоза Y. pseudotuberculosis. HPI кодирует белки, которые участвуют в биосинтезе, регуляции и транспорте сидерофоров иерсиниабактина (54, 55).По этой причине HPI называют «островом захвата железа». Полный остров высокой патогенности (HPI) был обнаружен у шести изолятов, тогда как один изолят (M489) не обладал никаким геном, связанным с HPI. Этот изолят принадлежит к серотипу O: 4, который, как известно, не имеет HPI (56). Три изолята обладали частичным HPI, в котором отсутствовали некоторые гены. На острове есть пять генов ( psn , irp1 , irp2 , ybtP и ybtQ ), которые участвуют в системе иерсиниабактина (54, 57, 58).Psn является рецептором внешней мембраны сидерофоров (59). Гены irp1 и irp2 кодируют высокомолекулярные белки, участвующие в нерибосомном синтезе иерсиниабактина (60). irp2 является маркером высокой патогенности и обнаруживается только у патогенных штаммов (61, 62). В изоляте M91 отсутствовали гены psn , irp1 и irp2 , а в двух изолятах (M102 и M126) отсутствовали только psn и irp1 соответственно.Некоторые другие гены острова высокой патогенности считаются ответственными за генетическую подвижность (56). Один из этих генов ( int ) кодирует интегразу, аналогичную интегразе фага P4 (63). Ген int был обнаружен во всех наших изолятах, кроме двух (M102 и M489). Эти два изолята были единственными, которые не содержали инсерционного элемента IS 100 , который участвует в геномных перестройках (56).
Таким образом, анализ содержания гена вирулентности в 10 изолятах позволяет предположить, что эти изоляты значительно различаются с точки зрения патогенного потенциала.Только четыре изолята выявили как плазмиду вирулентности pYV, так и важные гены ( ail , inv , полный HPI), расположенные на хромосоме. Тем не менее, поскольку вирулентность Y. pseudotuberculosis основана на нескольких факторах, ни один из изолятов не может считаться безвредным.
Родство выделенных штаммов Y. pseudotuberculosis. Для определения родства изолятов Y. pseudotuberculosis первоначальные эксперименты были выполнены с помощью анализа гель-электрофореза в импульсном поле (PFGE).Было получено пять различных моделей рестрикции с использованием фермента NotI (данные не показаны). У изолятов различались от двух до десяти рестрикционных фрагментов. Паттерны PFGE хорошо согласуются с данными по полному геному, на основании которых изоляты были разделены на четыре кластера (рис. 3A). Кластер A включает пять штаммов, все они принадлежат к серотипу O: 1A и MLST 42. Однако два штамма биотипа 2 этого кластера продемонстрировали различные паттерны рестрикции PFGE, чем три штамма биотипа 1, хотя они не показали значительно большего количества штаммов. однонуклеотидные полиморфизмы (SNP) (рис.3Б). Кластеры B и D содержат изоляты одного и того же биотипа (биотип 2), которые, однако, имеют разные серотипы и MLST (рис. 3A). Анализ SNP подтвердил тесную взаимосвязь штаммов внутри каждого кластера и более отдаленную взаимосвязь между кластерами. Один изолят (M489) отличался от всех остальных изолятов своим серотипом (O: 4) и MLST (ST23). Этот штамм наиболее отдаленно связан с другими штаммами и поэтому был отнесен к одному кластеру (C).
Рис. 3.Взаимосвязь изолятов.(A) Кластеризация определяется анализом всего генома. Также показаны результаты набора и содержание гена вирулентности. (B) Количество SNP, идентифицированных в каждом изоляте.
Выводы. Наше исследование показывает, что кабаны могут быть источником инфекции Y. pseudotuberculosis в Германии. Насколько нам известно, случаев иерсиниоза, вызванного употреблением в пищу мяса кабана, зараженного Y. pseudotuberculosis, пока не зарегистрировано. Однако, учитывая большое количество потребляемого мяса дичи, быстро увеличивающуюся популяцию кабанов в Европе и их распространение в окружающей среде, кабаны могут играть важную роль в эпидемиологии инфекций Yersinia.Десять штаммов Y. pseudotuberculosis были выделены из 503 миндалин дикого кабана, в то время как в три раза больше образцов были определены как положительные с помощью ПЦР. Модифицированный протокол, который был применен для культурного обнаружения этого вида, может быть полезен для дальнейших исследований. Анализ изолятов показал, что они весьма разнообразны. Это относится не только к биотипу, серотипу и MLST штаммов, но и к содержанию их генов вирулентности. Таким образом, у немецких диких кабанов существует несколько линий Y. pseudotuberculosis, и вероятно, что в будущем будут обнаружены дополнительные группы.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Отбор проб и выделение Y. pseudotuberculosis. Миндалины 503 отловленных диких кабанов были собраны в период с февраля 2015 г. по декабрь 2016 г. Возраст и пол животных приведены в таблице 2. Животные были отстрелены на северо-востоке. часть Бранденбурга и Мекленбург-Передняя Померания на загонных и индивидуальных охоте. После потрошения образцы немедленно брали стерильными перчатками и скальпелем для каждого животного и помещали в стерильные закрытые чашки для предотвращения перекрестного заражения.Образцы были доставлены в Федеральный институт оценки рисков Германии и хранили при 4 ° C. Образцы гомогенизировали в бульоне пептон-сорбитол-желчная соль (PSB) в течение 4 минут, используя Bagmixer 400 VW (10 ходов / с; Interscience, Saint Nom, Франция), чтобы получить разведение 1:10. Чтобы уменьшить количество сопутствующих бактерий, 10 мл тканевой жидкости дополнительно разводили в PSB в соотношении 1:10 и инкубировали в течение 6 часов при комнатной температуре с последующей инкубацией в течение 7 дней при 4 ° C. После этого геномную ДНК экстрагировали из 500 мкл гомогената термическим лизисом (95 ° C в течение 7 мин) и исследовали на наличие Y.pseudotuberculosis с помощью ПЦР с использованием в качестве мишени гена wzz , кодирующего детерминатор длины цепи О-антигена (64). Из каждой положительно протестированной миндалины 100 мкл гомогената (разведения 10 -5 , 10 -6 и 10 -7 ) помещали на агар цефсулодин-иргасан-новобиоцин (CIN) для получения отдельных колоний (65 ). Чашки с агаром инкубировали при 28 ° C в течение 48 часов. С каждой чашки до 20 предполагаемых колоний Y. pseudotuberculosis, проявляющих небольшой вид «яблочко», культивировали на агаре с лизогеническим бульоном (LB) при 28 ° C в течение 24 часов для дальнейшего анализа с помощью матричной лазерной десорбционной ионизации — время полета спектрометрия (MALDI-TOF MS).
MALDI-TOF MS-анализ. Масс-спектрометрические анализы выполняли с использованием системы MALDI-TOF MS (Microflex LT, Bruker Daltonics, Billerica, USA). Исследовали клеточный материал 20 подозрительных колоний каждого образца. Каждую колонию анализировали дважды. Обработку материала пробы для прямой передачи выполняли с использованием стандартного протокола Bruker. Измерения проводились с помощью программного обеспечения для классификации в реальном времени Bruker (версия 3.0) и сравнивались с базой данных биотипов MALDI.Штамм Y. pseudotuberculosis IP 32953 (Institut Pasteur, Франция) использовали в качестве контроля процесса.
Био- и серотипирование. Биотипирование применялось как для подтверждения вида, так и для определения биотипа. Для подтверждения вида Y. pseudotuberculosis были проведены следующие биохимические тесты: Voges Proskauer, индол, цитрат, сорбит, сахароза, рамноза, эскулин и мелибиоза. Биотип изолятов определяли путем изучения метаболизма мелибиозы и раффинозы, а также метаболического превращения цитрата (66).
Молекулярное серотипирование изолятов проводили с помощью мультиплексной ПЦР с использованием девяти пар праймеров, нацеленных на различные области кластера О-антигенов Y. pseudotuberculosis (64). В качестве контролей использовали изоляты коллекции штаммов BfR, представляющие различные серотипы Y. pseudotuberculosis (O: 1a, O: 1b, O: 3, O: 4 и O: 5).
Тестирование на чувствительность к противомикробным препаратам. Тестирование на чувствительность к противомикробным препаратам проводилось с использованием микроразбавления бульона в соответствии с рекомендациями CLSI (CLSI M07-A10) (67) и эпидемиологическими пороговыми значениями EUCAST (ECOFF) (http: // www.eucast.org/).
Биоинформатический анализ данных WGS. Интересующие области ДНК были получены из данных WGS изолятов и проанализированы с использованием различных инструментов программного пакета Lasergene (v14.0) (DNAStar, Madison, WI, США). Для профилирования гена вирулентности in silico было отобрано 15 последовательностей, как сообщалось ранее (51, 68) (таблица 3). ПЦР использовали для подтверждения отсутствия некоторых генов.
Типы мультилокусных последовательностей изолятов Y. pseudotuberculosis были определены с использованием сетевого MLST 1.8 аналитических материалов Центра геномной эпидемиологии (69).
Филогенетические отношения (дерево SNP) оценивали с помощью программного инструмента CSI Phylogeny от Центра геномной эпидемиологии (70).
Для биоинформатического анализа использовали полногеномные последовательности следующих геномов Y. pseudotuberculosis (номера доступа): MNKQ00000000 (M66), MNKR00000000 (M68), MAKS00000000 (M69), NCLA00000000 (M89), MAKT00000000 (M90), MNKT00000000 (M102), MAKU00000000 (M126), NCLF00000000 (M489), NCKY00000000 (M207) и MAKV00000000 (M129).
Иерсиниоз — Болезни и состояния — Публикации — Общественная информация
Иерсиниоз
Что такое иерсиниоз?
Иерсиниоз (yer-sin-ee-o-sis) — это заболевание, вызываемое бактериями под названием Yersinia . Хотя многие виды Yersinia встречаются во всем мире, большинство человеческих болезней вызывается Yersinia enterocolitica . Другие виды Yersinia , поражающие людей, — это Y. pseudotuberculosis , вызывающий болезнь, аналогичную Y. enterocolitica, и Y. pestis , вызывающий чуму. Yersinia — выносливые бактерии, которые могут выжить в неблагоприятных условиях, таких как охлаждение и среда с низким содержанием кислорода.
Наиболее частым источником инфекции Y. enterocolitica у людей является свинина (сырая или недоваренная), а свиньи считаются основным переносчиком. Другие штаммы Yersinia также встречаются у многих других животных, включая грызунов, кроликов, овец, крупный рогатый скот, лошадей, собак и кошек.
Насколько распространен иерсиниоз?
В Онтарио в течение 2003-2009 гг. Ежегодно регистрировалось в среднем от двух до трех подтвержденных случаев иерсиниоза на 100 000 человек. 1 На младенцев и детей раннего возраста приходится около двух третей всех случаев иерсиниоза. Заражение чаще встречается зимой по сравнению с другими сезонами года.
Каковы симптомы иерсиниоза?
Лица, инфицированные Yersinia , могут иметь различные симптомы в зависимости от возраста инфицированного человека.
Общие симптомы у детей:
- лихорадка
- боль в животе и
- понос (часто с кровью)
У детей старшего возраста и взрослых наиболее частыми симптомами являются:
- боль в животе справа и
- лихорадка
Осложнения, такие как кожная сыпь, боли в суставах или распространение бактерий в кровоток, могут возникнуть в небольшом количестве случаев.
Симптомы иерсиниоза обычно начинаются через три-семь дней (обычно менее 10 дней) после заражения человека и длятся примерно от одной до трех недель, хотя иногда симптомы могут длиться дольше.
Если у вас есть какие-либо признаки и симптомы болезни, и вы подвергались воздействию возможных источников бактерий Yersinia , обратитесь к врачу.
Как передается иерсиниоз?
Иерсиниоз обычно связан с потреблением пищи или воды, зараженных бактериями Yersinia , или при контакте с человеком или животным, инфицированным бактериями Yersinia .
Бактерии Yersinia живут в кишечнике инфицированных людей / животных и выделяются с испражнениями.Сырое мясо инфицированных животных может быть заражено во время убоя. Если не соблюдать правила гигиены рук после посещения туалета или работы с сырым мясом, человек, зараженный бактериями Yersinia , может переносить бактерии на продукты питания и предметы. Младенец или ребенок могут заразиться, если родитель или опекун обращается с зараженной пищей и не моет должным образом руки перед тем, как взять в руки младенца или ребенка и его пищу, бутылочки, пустышки или игрушки.
Вы также можете заразиться:
- употребление в пищу зараженных пищевых продуктов, особенно сырых или недоваренных продуктов из свинины
- Попадание внутрь зараженной питьевой или рекреационной воды
- потребление загрязненного непастеризованного молока или непастеризованных молочных продуктов, или
- положить в рот что-то, что контактировало с пометом инфицированных животных или калом инфицированных людей
- детей могут заразиться, если засунут руку в рот после или во время игры с инфицированными щенками и котятами.
Как диагностируют и лечат иерсиниоз?
Иерсиниоз обычно диагностируется путем обнаружения бактерий Yersinia в стуле. Организм также можно обнаружить в образцах с других участков тела.
Большинство людей со здоровой иммунной системой выздоравливают без лечения. Лечение иерсиниоза обычно включает только устранение симптомов. Например, людям с диареей, как правило, следует пить много жидкости, чтобы избежать обезвоживания.В более тяжелых или сложных случаях могут потребоваться антибиотики.
Если вы подозреваете, что у вас иерсиниоз, вам следует обратиться к врачу для обследования, совета и лечения.
Как предотвратить иерсиниоз?
Самая важная профилактическая мера — соблюдение правил гигиены.
Соблюдайте правила гигиены рук. Вымойте руки водой с мылом:
- перед едой и обращением с пищей
- после прикосновения к сырому мясу
- после обращения с сырой свининой / сеголетками
- после посещения туалета
- после оказания помощи другим людям с туалетом
- после смены подгузников
- после ухода за больным диареей
- после контакта с животными (если у вашей собаки или кошки диарея, при уходе за ними часто мойте руки) и
- после посещения контактного зоопарка (мыть руки детям после посещения контактного зоопарка).
Тщательно готовьте все мясо.
Употребляйте только молоко или молочные продукты, которые были пастеризованы.
Безопасное обращение с продуктами: используйте отдельные разделочные доски для сырого мяса и готовых к употреблению продуктов. После приготовления сырого мяса очистите и продезинфицируйте все разделочные доски, столешницы и посуду.
Защищать источники питьевой и рекреационной воды от фекалий животных и человека.
Избегайте питьевой воды из неглубоких колодцев, рек, озер или ручьев.Пейте только чистую воду. Если вы не уверены, обработайте воду самостоятельно, например, кипячением не менее пяти минут.
Что вызывает вспышки иерсиниоза?
Многие случаи иерсиниоза связаны с употреблением в пищу сырой или недоваренной свинины. Вспышки в прошлом были связаны с шоколадным молоком, тофу и свиными цыплятами (пища, приготовленная из тонкого кишечника свиней). Сообщалось также о случаях заболевания людей, связанных с заболеванием домашних животных, особенно щенков и котят.
Список литературы
- Министерство здравоохранения и долгосрочного ухода Онтарио, база данных интегрированной информационной системы общественного здравоохранения ( iPHIS ), извлечено в апреле 2010 г.
- Heymann. Д.Л. «Пособие по борьбе с инфекционными заболеваниями». 19-е издание. 2008. Американская ассоциация общественного здравоохранения: Вашингтон, , округ Колумбия, .
- BC Веб-сайт Центра по контролю за заболеваниями
- США Веб-сайт центров по контролю и профилактике заболеваний
Этот информационный бюллетень предоставляет только основную информацию.Он не должен заменять медицинский совет, диагноз или лечение. Всегда говорите со специалистом в области здравоохранения о любых проблемах со здоровьем, прежде чем вносить какие-либо изменения в свой рацион, образ жизни или лечение.
Иерсиниоз — NYC Health
Что такое иерсиниоз?
Иерсиниоз — это инфекция кишечника, вызываемая бактериями (микробами) Yersinia enterocolitica или Yersinia pseudotuberculosis .У детей может быть кровавый понос, а у взрослых — боли в суставах. Для получения данных об иерсиниозе в Нью-Йорке посетите EpiQuery.
Кто болеет иерсиниозом?
Любой может заболеть иерсиниозом. Однако большинство случаев, вызванных Yersinia enterocolitis , встречается у младенцев и детей раннего возраста, тогда как Yersinia pseudotuberculosis чаще всего поражает людей в возрасте от 5 до 20 лет.
Как передается иерсиниоз?
Иерсиниоз передается при употреблении в пищу или питье зараженной пищи или воды.Микробы Yersinia встречаются у многих животных, особенно у свиней (свиней). Инфекции пищевого происхождения часто связаны с зараженной сырой свининой и продуктами из нее.
Где обнаружены микробы
Yersinia ?Животные являются основным источником Yersinia . Отходы животных могут загрязнять воду, молоко и продукты питания и стать источником инфекции для людей или других животных. Этот микроб был обнаружен в мясном ассорти, свинине, сыром молоке, мороженом, неправильно пастеризованном шоколадном молоке, тофу, моллюсках, озерах, ручьях, а также диких и домашних животных.
Каковы симптомы иерсиниоза?
Люди, инфицированные бактериями Yersinia , могут иметь диарею, лихорадку и дискомфорт в животе. Симптомы могут напоминать аппендицит.
Как скоро после заражения появляются симптомы?
Симптомы обычно появляются в течение 3-7 дней после заражения.
Как диагностируется иерсиниоз?
Иерсиниоз диагностируется путем выявления бактерий Yersinia в кале (фекалиях).
Как лечится иерсиниоз?
Иерсиниоз можно лечить антибиотиками, такими как триметоприм-сульфаметоксазол. Yersinia обычно устойчива к пенициллину.
Следует ли исключить инфицированного человека из школы или работы?
Поскольку Yersinia бактерий находятся в стуле (фекалиях), следует изолировать только людей с активной диареей, которые не могут контролировать свои привычки кишечника (например, младенцы, маленькие дети, некоторые инвалиды).Большинство инфицированных людей могут вернуться к работе или учебе, когда у них образуется стул, если они тщательно моют руки после посещения туалета. Обработчики пищевых продуктов, медицинские работники и дети в дневных учреждениях должны получить разрешение Департамента здравоохранения, прежде чем вернуться к своей повседневной деятельности. Для этого может потребоваться повторный анализ стула, чтобы убедиться, что он больше не заразен.
Как предотвратить иерсиниоз?
Берегите пищу от бактерий.
- Всегда обращайтесь с сырой птицей, говядиной и свининой как с потенциально зараженными и обращайтесь с ними соответствующим образом: на рынке заверните свежее мясо в полиэтиленовые пакеты, чтобы кровь не капала на другие продукты.
- Своевременно охлаждать продукты; минимизировать выдержку при комнатной температуре.
- Разделочные доски и столешницы, используемые для приготовления, следует мыть сразу после использования, чтобы предотвратить перекрестное загрязнение с другими продуктами питания.
- Убедитесь, что достигается правильная внутренняя температура приготовления, особенно при использовании микроволновой печи.
- Избегайте употребления сырого или недостаточно приготовленного мяса.
- Избегайте использования сырого молока.
Часто мойте руки.
- Всегда тщательно мойте руки с мылом и теплой проточной водой перед тем, как прикасаться к еде, кормить младенцев и после работы с сырым мясом.
- Поощряйте тщательное мытье рук водой с мылом после посещения туалета или смены подгузников, а также до и после приготовления пищи.
- Следите за тем, чтобы дети, особенно те, кто держат домашних животных, тщательно мыли руки.
Иерсинии и иерсиниоз | Глобальный проект по водным патогенам
Энтеропатогенные иерсинии широко признаны возбудителями острого энтерита с начала 1960-х годов. Зарегистрированные случаи исторически происходят в основном из регионов с умеренным климатом, и они не признаются в качестве основных причин диареи в большинстве стран, но некоторые исследования показали, что они обычно изолированы от источников водоснабжения и случаев диареи в тропических странах. Род Yersinia включает восемнадцать видов, три из которых являются общепризнанными патогенами человека: Yersinia pestis , Yersinia pseudotuberculosis и Yersinia enterocolitica .Все три являются зоонозными патогенами, с ограниченным распространением болезни среди людей, и все они содержат одинаковую плазмиду вирулентности. Yersinia pestis вызывает бубонную чуму, острое системное заболевание, передающееся при укусе блох или тесном респираторном контакте, а Yersinia pseudotuberculosis и Yersinia enterocolitica вызывают кишечное заболевание, известное как иерсиниоз. Yersinia enterocolitica , как сообщается, вызывает диарейные заболевания у людей по крайней мере в 10-100 раз чаще, чем Y.pseudotuberculosis и будет организмом, который будет рассматриваться в первую очередь в этой главе. Y. enterocolitica обычно ассоциируется с терминальным илеитом, а Y. pseudotuberculosis — с мезентериальным аденитом. Однако оба микроорганизма могут вызывать мезентериальный аденит и симптомы боли и болезненности в правом нижнем квадранте живота, имитирующие аппендицит (псевдоаппендицит), что приводит к хирургическому удалению нормального или слегка воспаленного аппендикса. Диагноз основывается на культуре организма или серологии выздоравливающего. Y. pseudotuberculosis и некоторые более редкие штаммы Y. enterocolitica особенно склонны вызывать системную инфекцию, что также более вероятно у пациентов с диабетом или перегрузкой железом. Системный сепсис поддается лечению антимикробными препаратами, но постинфекционная артропатия плохо поддается лечению.
Y. enterocolitica был выделен из очищенной питьевой воды в Индии и неочищенной воды во многих странах. И Y. enterocolitica , и Y.pseudotuberculosis были выделены из фекалий многих диких и домашних животных, и считается, что это основной резервуар, влияющий на людей через загрязнение пищи и воды. И Y. enterocolitica , и Y. pseudotuberculosis могут выжить внутри Acanthamoeba castellani. Y. enterocolitica сохраняется в цитоплазме Acanthamoeba , а Y. pseudotuberculosis внутри фагоцитарных вакуолей. Yersinia pseudotuberculosis в течение длительного времени сохраняется в слепой кишке лабораторных мышей и в кишечнике почвенных нематод.Было показано, что Y. pestis входит в жизнеспособное, но не культивируемое состояние в воде и сохраняется в почве, и вполне вероятно, что Y. pseudotuberculosis может делать то же самое.